二苯乙烯苷对小鼠海马依赖性学习记忆影响及机制-effect and mechanism of stilbene glycoside on hippocampus - dependent learning and memory in mice.docxVIP

缩略词表BDNFbrain-derivedneurotrophicfactor脑源性神经营养因子CaMKIIcalcium/calmodulin-dependentproteinkinaseII钙/钙调蛋白激酶IICFCCREBcontextualfearconditioningcAMPresponseelementbindingprotein条件性恐惧记忆cAMP反应元件结合蛋白EPMelevatedpluzmaze高架十字迷宫ERKsextracellularsignal-regulatedkinases细胞外信号调节激酶LTPmicroRNAmiR-134long-termpotentiationmicroRibonucleicAcidmicroRibonucleicAcid-134长时程增强微小核糖核酸微小核糖核酸-134NMDAN-methyl-D-aspartateN-甲基-D-天门冬氨酸NORRT-PCRReal-timeqPCRnovelobjectrecognitionreversetranscriptionpolymerasechainreactionreal-timequantitativepolymerasechainreaction新物体认知逆转录聚合酶链式反应实时荧光定量聚合酶链式反应SIRT1silentinformationregulatortype1沉默信息调节因子类型1THSGtetrahydroxystilbeneglucoside二苯乙烯苷中文摘要第一部分二苯乙烯苷对小鼠海马依赖性学习记忆的影响目的：随着我国老龄化速度不断增快，阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease，AD）、帕金森病（Parkinson’sdisease，PD）及血管性痴呆（vasculardementia，VD）等衰老相关的神经退行性疾病的研究、预防和治疗已成为刻不容缓的问题。何首乌作为一种从我国古代沿用至今的抗衰老名贵中药，其主要活性成分是具有多酚结构的二苯乙烯苷（tetrahydroxystilbeneglucosid，THSG）。近来有研究发现，THSG可明显改善衰老大鼠和APP转基因AD模型鼠的学习记忆能力。本实验室前期研究也发现THSG可促进小鼠的海马突触可塑性。本实验旨在从行为学角度研究慢性给予THSG对小鼠正常学习记忆能力的影响。方法：将C57BL小鼠分为四组（对照组：生理盐水，NS；低剂量组：THSG20mg/kg；中剂量组：THSG40mg/kg；高剂量组：THSG80mg/kg），连续灌胃给药一个月。通过行为学和离体场电位实验来观察THSG对小鼠正常学习记忆的影响。结果：在各组小鼠的痛域和焦虑状态无明显区别的情况下，THSG给药可明显增强小鼠的情景性条件恐惧的记忆能力，呈剂量依赖性变化。新物体认知实验发现，THSG给药组动物对新物体的探索时间和探索频率均明显高于对照组，且呈剂量依赖性增加。脑片场电位记录结果显示，相对于生理盐水对照组，THSG明显易化小鼠海马区长时程增强（long-termpotentiation，LTP），且呈剂量依赖性改变。结论：慢性灌胃给予THSG可明显增强小鼠海马区LTP和学习记忆能力。关键词：二苯乙烯苷；长时程增强；新物体认知；条件恐惧记忆第二部分二苯乙烯苷增强小鼠海马依赖性学习记忆的机制目的：THSG对学习记忆的增强作用已在细胞和动物水平上得到证实，其机制研究虽略有涉及，但并不深入。近来研究表明，microRibonucleicAcid（miRNA）在学习记忆和神经精神精神疾病中发挥重要作用。THSG能显著影响小鼠的学习记忆行为，是否也与其调节miRNA有关呢？本实验旨在从学习记忆相关的蛋白激酶和基因水平研究并确定THSG促进学习记忆的作用靶点，进一步探讨THSG改善认知功能的机制，为THSG作为促智药应用提供实验依据。方法：通过westernbloting及real-timeqantitativepolymerasechainreaction（real-timeqPCR）技术，观察慢性灌胃给予THSG对小鼠海马区蛋白表达及miR-134表达的影响；通过高尔基染色观察其对海马区树突棘密度的影响。结果：Westernbloting结果显示，与生理盐水对照组相比，THSG明显增加海马沉默信息调节因子类型1（silentinformationregulatortype1，SIRT1）的表达。Real-timeqPCR检测发现给药组miR-134的表达明显低于对照组，且与SIRT1表达呈负相关。此外，THSG给药组的磷酸化cAMP反应元件结合蛋白（phospho-cAMPresponseelementbindingprotein，p-CREB）和脑源性神经营养因子（b