仿生双模板法制备fcsfha复合物及作为骨支架材料的应用-preparation of fcs fha composite by bionic double template method and its application as bone scaffold material.docxVIP

摘要天然骨是一种在有机分子作为矿化模板的调节和控制作用下合成的矿物质，从生物模 拟的角度来看，仿生合成的有机/无机复合材料与人骨的结构和成分越相近，则其性能越优 异。本论文采用仿生合成法，在温和条件下选用双有机模板诱导矿化制备了羟基磷灰石复 合材料，探讨了两种有机分子作为模板对羟基磷灰石形貌的影响，两种有机模板不同比例 时对羟基磷灰石的形貌的影响，利用 SEM、XRD、FITR、TGA 等检测手段分析了合成产 物的形貌以及组成，同时结合 EDS 分析了羟基磷灰石复合材料的钙磷比。为了评估复合材 料的生物学性能，选用小鼠成纤维细胞为试验细胞对其进行了体外细胞毒性测试。我们也 用双模板介导制备的羟基磷灰石复合材料作为粉体原料，鱼胶原/丝素蛋白作为液相溶液制 备了支架，并进行了力学性能测试。主要的研究内容和结论如下：（1）有机模板的种类、组合及比例对矿化产物羟基磷灰石的形貌影响，结果发现：鱼胶原 介导矿化的羟基磷灰石形貌为片状，丝素蛋白介导矿化的羟基磷灰石形貌为棒状，鱼胶原/丝素蛋白制备出针状结构的羟基磷灰石。鱼胶原和丝素蛋白协同作用矿化过程时，随着丝 素蛋白含量的增加，羟基磷灰石的长径比增加。（2）本实验选用小鼠成纤维细胞为体外试验细胞，分别使用倒置显微镜、CCK-8 法检测方 法评价细胞在复合材料上在浸提液中生长以及增殖情况，考察了不同复合材料对成纤维细 胞的细胞相容性。实验结果发现：成纤维细胞在双模板复合材料浸提液培养时测量的的 OD 值高于单模板复合材料，高于纯羟基磷灰石，结果表明双模板复合材料具有良好的骨诱导 活性，双模板介导制备的复合材料具有良好的细胞相容性。（2）用双模板诱导矿化的羟基磷灰石复合材料为骨支架的粉体原料，添加丝素蛋白/胶原 蛋白作为液相，选用共混法和冷冻干燥法制备出支架。结果表明：复合材料制备的支架的 抗压强度比对照组高，微观结构表征发现复合支架含有孔洞结构，有利于非组织纤维的长 入和骨细胞的黏附，丝素蛋白的加入有利于提高支架的抗压强度。关键词：羟基磷灰石；双模板；仿生矿化；细胞相容性；骨支架；抗压强度IAbstractThe natural bone is a kind of mineral which was synthesized under the control of the organic molecules as template molecule. From the point view of biological modeling, it is considered that the excellent properties of the mineralized organic/inorganic composite material would be more similar to the natural bone in the aspect of structure and composition. This paper used the double organic template through the method of biomimetic synthesis, successfully synthesized the the hydroxyapatite composite under mild experimental condition. We characterized the morphologies of hydroxyapatite products under the two kind of organic molecule as template molecule. Thephase compositions and micro structures of reaction products were studied by XRD、FIRT、TGAand SEM, and analysis the calcium phosphate ratio of composite by EDS. We also discussed the biocompatibility of the composites was evaluated by cytotoxicity test through mouse fibroblast cell (3T3) in vitro experiment. We also use the bi-template hydroxyapatite composite as bone scaffold materials, fish collagen /silk fibroin solution as the liquid phase, th