改良2-v0法制备的大鼠vd模型及迷迭香复合精油改善其学习记忆的实验研究-experimental study on improving learning and memory of rats vd model made by modified 2 - v0 method and rosemary compound essential oil.docxVIP

英文缩略词表英文缩写英文名称中文名称ANOVAAnalysis of Variance方差分析Astastrocyte星形胶质细胞CCAcommon carotid artery颈总动脉CBFcerebral blood flow脑血流量CVACerebrovascular accident脑卒中CNSCentral nervous system中枢神经系统ECAExternal carotid artery颈外动脉ICAInternal carotid artery颈内动脉CVDCerebrovascular disease脑血管病ADAlzheimer disease阿尔茨海默病VDvascular dementia血管性痴呆SDSprague-Dawley ratsSD 大鼠2-VObilateral common carotid arteries ligation 双侧颈总动脉结扎法VCIAch ChATAchE hminVascular cognitive impairment acetylcholinecholine acetyltransferase acetylcholinesterase hourminute血管性认知障碍乙酰胆碱 胆碱乙酰转移酶 胆碱酯酶小时 分钟smlsecondmilliliter秒毫升mgdmilligramday毫克天中文摘要目的: 探讨改良的双侧颈总动脉结扎法制备的大鼠慢性大脑灌注不足引起的血管 性痴呆模型的稳定性和可靠性,并通过给予吸嗅迷迭香复合精油观察其对 于大鼠的学习记忆功能、海马 CA1 区的形态学及胆碱乙酰转移酶表达的影 响。方法: 1）采用双侧颈总动脉结扎法（2-VO）法造成大鼠永久慢性大脑灌注不足导 致的血管性痴呆（VD）模型。雄性 2 月龄 SD 大鼠 48 只，随机分为传统 2-VO 组 20 只，改良 2-VO 组 20 只和假手术组 8 只。传统组同时结扎双侧颈总动 脉；改良组先结扎右侧颈总动脉，1w 后再次结扎左侧的颈总动脉。 在术后 48h 和 60d 记录各组的存活率，2 个月后进行水迷宫试验来测定大鼠的空间 学习记忆和运动能力。水迷宫试验结束后处死大鼠，观察海马和纹状体的 形态学变化。2）采用改良的 2-VO 法造成大鼠永久慢性大脑灌注不足导致的血管性痴呆（VD）模型。雄性 2 月龄 SD 大鼠 60 只，随机分为正常对照组（n=10），假 手术组（n=10），改良的 2-VO 法造模 48h 后成活大鼠再次随机分为模型组（n=10），迷迭香复合精油组（n=10）和依达拉奉组（n=10）。迷迭香复合 精油组给予吸嗅用三种具有醒脑开窍的迷迭香,丁香和薄荷精油配制成的 复合精油，依达拉奉组给予腹腔注射依达拉奉注射液，各持续 65d。通过水 迷宫试验来观察大鼠造模后有无学习记忆功能减退和吸嗅迷迭香复合精油 后学习记忆能力有无改善，并采用免疫组化技术观察海马 CA1 区组织形态 学变化和与学习记忆有关的胆碱乙酰转移酶表达的变化。结果: 1)改良组与传统组大鼠术后 48h 及 60d 的死亡率比较都明显降低（p﹤0.05）。 两种模型组大鼠学习记忆能力与假手术组比较有显著差异性（p﹤0.01）， 而两种模型大鼠组间学习记忆功能无显著性差异（p﹥0.05）。各组大鼠的 运动功能比较无明显差异性（p﹥0.05）。两种模型组大脑海马区及纹状体均发生明显神经形态学改变。2)改良的 2-VO 法制备的大鼠慢性大脑灌注不足引起的血管性痴呆模型存活 率较高为 75%，各组大鼠的运动功能比较无明显差异性（P﹥0.05）。30d 和 60d 定位航行试验显示模型组大鼠平均逃避潜伏期与假手术组和正常对照 组比较有显著差异性（P﹤0.01），而迷迭香复合精油组明显短于模型组 (P0.01)与依达拉奉组相比未见显著差异。空间探索试验中跨越原平台的 次数，模型组大鼠与假手术组和正常对照组比较有显著差异性（P﹤0.01）， 迷迭香复合精油组明显多于模型组(P0.01)，与依达拉奉组相比未见显著 差异。模型组大脑海马区及纹状体发生明显的病理形态学改变；免疫组化 中各组大鼠海马 CA1 区 CHAT 的灰度值和阳性单位数比较，模型组与正常组 及假手术组比较有显著差异性 P0.01，迷迭香复合精油组和依达拉奉组与 模型组比较有显著差异性 P0.01，迭香复合精油组与依达拉奉组比较无显 著差异性 PO.O5。迷迭香复合精油组及依达拉奉组与模型组相比海马区神 经细胞损害较轻，CHAT 阳性细胞表达明显增加。结论：1）改良的 2-VO 法可以复制大鼠大脑永久性慢性灌注不足引起的 VD 模型, 引起与记忆有关的海马及纹状体损害，而运动功能未见损害。改良后的 2-VO 法和传统的方法在血管性痴呆造模上没