[临床医学]神经系统疾病得免疫学检测指标及临床意义.ppt

神经系统疾病的免疫学检测指标及临床意义 首都医科大学附属天坛医院神经内科 张星虎 内容 免疫学诊断方法介绍 各种神经系统疾病的免疫学检测指标 神经系统感染性疾病 神经系统免疫性疾病 副肿瘤综合症 系统性免疫性疾病 免疫学诊断的相关概念 结果表示：定性、半定量、定量 效价或滴度（titer） 敏感性：某种检测方法显示的阳性例数/所检测的确定诊断的病例数 特异性：某种检测方法显示的阴性例数/所检测的无关病例数 假阳性：1-特异性 假阴性：1-敏感性 免疫学诊断方法 检测靶点 特异性抗原 特异性抗体 检测方法 沉淀试验 补体结合试验 凝集试验 免疫荧光试验 酶联免疫吸附试验 放射免疫检测 核心：抗原与特异性抗体结合，通过示踪剂（核素、酶反应、荧光素等）显示反应结果 免疫沉淀试验 用于特异性抗原检测 原理：抗原在碱性缓冲液中带负电荷，在电场中向正极移动，而抗体由于接近等电点，借内渗液流作用缓慢移向负极，在一定的时间内，二者会聚，形成沉淀线。 补体结合试验 用于检测特异性抗原或抗体。 原理：利用抗原-抗体结合后能够吸附和激活补体的特性。第一步用已知的抗原（抗体）加入待测的抗体（抗原），加入补体。第二 步羊红细胞及相应抗体的指示系统，如存在未知的抗体（或抗原）则吸附补体，后加入的指示系统缺乏补体而不溶血，否则，产生溶血。 凝集试验 大颗粒抗原与相应抗体相结合，形成可见的凝集复合物。 分类：细菌凝集反应、直接血细胞凝集反应、间接血细胞凝集反应、反相血凝、协同凝集、乳胶凝集反应 间接血凝：先将特异性抗原吸附于绵羊红细胞上，加入待测样本，如果样本中含有特异性抗体，就会与羊红细胞上的抗原结合，使羊红细胞产生凝集反应。 免疫荧光试验 用荧光色素标记已知的抗体或抗原，在特定条件下用标记物浸染标本，使标记的抗体或抗原与待测的抗原或抗体结合，用荧光显微镜观察形成的抗原抗体复合物。 酶联免疫吸附试验（ELISA） 原理：将已知的抗原或抗体吸附于固相载体上（包被），加入待测样本使抗原抗体特异性结合，加入酶标抗体，通过酶促反应作用于特定的底物，产生成色反应，通过酶标仪测定结果。 分类：间接法、双抗体夹心法、竞争法 特点：操作简便快速、敏感性及特异性高 放射免疫法 原理：同位素标记抗原和非标记抗原对已知特异性抗体的竞争抑制反应。 神经系统感染性疾病的免疫学诊断 单纯疱疹病毒性脑炎 细菌性脑膜炎 结核性脑膜炎 隐球菌脑膜炎 脑囊虫病 神经梅毒 AIDS 单纯疱疹病毒性脑炎 CSF HSV抗体阳性判定标准 滴度达1：80以上 血与CSF抗体比小于40 CSF抗体有4倍以上升高 TORCH 弓形虫（Toxoplasma） 风疹病毒（Rubella?Virus） 巨细胞病毒（Cytomegalovirus） 单纯疱疹病毒（Herpes simpiex?Virus） 细菌性脑膜炎 指标：细菌抗原 检测方法：对流免疫电泳、乳胶凝集试验、放射免疫法及ELISA等 临床不常用 结核性脑膜炎 指标：结核抗体 检测方法：ELISA法检测 检测的敏感性、特异性与所用的方法以及所用的抗原特异性有关。 常用的抗原：PPD 新型隐球菌脑膜炎 CSF隐球菌荚膜多糖抗原检测 脑囊虫病 囊虫抗体检测： 方法：ELISA、IHA、IF、LA等 阳性率80％以上，特异性90％以上 两种方法联合可提高阳性率 CSF抗体检测更有意义，血清抗体只能说明体内有过感染或正在感染 囊虫抗原检测 ELISA 可用于诊断及疗效评价 神经梅毒 非特异性：VDRL、RPR、USR 特异性：TPHA、FTA-ABS VDRL(Venereal Disease Research Laboratory) 抗原与抗体（反应素）反应，加入卵磷脂加强心磷脂的抗原性，加入胆固醇增强抗原的敏感性 优点特异性较高，用于诊断神经梅毒的特异性为100%，美国CDC诊断标准提到若CSF－VDRL实验(+)，即可诊断神经梅毒 缺点敏感性仅为27%，特别是在无症状神经梅毒中仅10%。抗原需要灭活，试剂需临时配制，需要显微镜，目前多用改良RPR实验代替。 USR (unheated serum reagin) 应用改良的VDRL抗原 优点抗原不需灭活，操作时间短 缺点借助显微镜观察 RPR(rapid plasma reagin ) 与USR原理相似 抗原结合在活性炭上，出现肉眼可见的凝聚颗粒 优点抗原不需灭活，不需临时配制，不需显微镜 缺点较VDRL易出现假阳性 TPHA (treponema pallidum haemagglutination assay) FTA-ABS (fluorescent treponemal antibody absorbance test) 抗原吸附于玻片 再加血清（抗体） 加入荧光素标记的抗人IgG