病毒得复制.ppt

§3 病毒的复制 一、病毒的复制周期 病毒增殖所需的原料、能量和生物合成的场所均由宿主细胞提供，在病毒核酸的控制下合成病毒的核酸(DNA或RNA)与蛋白质等成分，然后在宿主细胞的细胞质或细胞核内装配为成熟的、具感染性的病毒粒子,再以各种方式释放至细胞外,感染其它细胞。这种增殖方式称为复制(replication)。整个过程称为复制周期(replicative cycle)。 (二)、病毒的复制周期（replicative circle） 复制周期：自病毒吸附于细胞开始，到子代病毒从感染细胞释放到细胞外的病毒复制过程。 ① 吸附；② 侵入；③ 脱壳；④ 病毒大分子的合成，包括病毒基因组的表达与复制；⑤装配与释放； 一些复杂的病毒，如痘苗病毒、单纯疱疹病毒等有数种反受体分子，而且反受体可能有几个功能结构域，各与不同的受体作用。 （2）细胞受体（病毒受体）：是指能被病毒吸附蛋白特异性的识别并与之结合，介导病毒进入细胞，启动感染发生的细胞表面组分。 病毒受体是细胞的功能性物质，为细胞正常生长代谢所必需的，而非病毒专一性的成分，如狂犬病毒的受体是乙酰胆碱受体，而单纯疱疹病毒的受体是硫酸乙酰肝素。 又称病毒内化，是一个病毒吸附后几乎立即发生，依赖于能量的感染步骤。 不同病毒－宿主系统的病毒侵入机制不同。 （1）、有尾噬菌体： 注射方式：将噬菌体核酸注入细胞， 3、脱壳 脱壳是病毒侵入后，病毒的包膜和/或壳体除去而释放出病毒核酸的过程，是病毒基因组进行功能表达所必需的感染事件。 三、病毒大分子的合成 病毒基因组进入胞内，宿主细胞的代谢发生改变，病毒利用宿主的生物合成机构和场所，使病毒核酸表达和复制，产生大量的病毒蛋白质和核酸。 四、病毒的装配与释放 在病毒感染的细胞内，新合成的毒粒结构组分以一定的方式结合，组装成完整的病毒颗粒，称做病毒的装配，亦称成熟（maturation）或形态发生。 大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放。 丝杆噬菌体（如M13或fd）不杀死细胞，子代毒粒以分泌方式不断从受染细胞中释放，并同时完成毒粒的组装。 有包膜病毒的装配与释放有时也是同时完成的，在从宿主细胞核芽出或细胞质膜芽出的过程中裹上包膜而形成包膜病毒。 五、温和噬菌体的溶源性反应 噬菌体的生活史有两种：溶菌性的、溶源性的。 溶菌性噬菌体在寄主细胞内复制大量子代噬菌体，然后寄主细胞裂解，成熟的噬菌体一下子释放出来。 1、免疫性。 溶源菌对本身所携带的原噬菌体的同源噬菌体有特异性免疫力，这是所有的溶源性细菌都具有的一个重要性质。 作 业 1、名词解释 一步生长曲线、溶源化细菌、温和噬菌体、原噬菌体 成熟的子代病毒颗粒然后依一定途径释放到细胞外。病毒的释放标志病毒复制周期结束。 T4噬菌体的装配是一个极为复杂的自我装配的过程 噬菌体 腺病毒 噬菌体的繁殖 狂犬病毒的侵染和复制 溶源性噬菌体:也叫温和噬菌体，感染宿主细胞后，噬菌体的DNA整合到寄主染色体上，随着染色体复制，并传到后代，不产生溶菌现象。如λ噬菌体 Lambda-Phage Lambda-Phage (E.Coli) Drawing of phage lambda ★温和噬菌体的三种存在形式： 游离态：已成熟释放并有侵染性的游离噬菌体粒子 整合态：整合在宿主染色体上处于前噬菌体的状态 营养态：前噬菌体经外界理化因素诱导后，脱离宿主核基因组而处于积极复制和装配的状态 1、原噬菌体（prophage）:整合到寄主染色体上的噬菌体核酸称为原噬菌体。 2、溶源化细菌（lysogenic bacteria） :带有原噬菌体的细菌称为溶源化细菌。 原噬菌体整合在染色体上，对溶源化细菌一般没有不良影响，细菌可以正常生长繁殖。 (一)、几个概念 ① ② → ③ ④ ⑤ 裂解性循环 溶源性循环 整合 自发或诱导 吸附 侵入 增殖 成熟 裂解 同步复制 多次循环 烈性噬菌体与温和噬菌体生活史区别 （二）、溶源化细菌的特性 * * （一）、一步生长曲线 一步生长曲线：以适量的病毒接种于标准培养的高浓度的敏感细胞，待病毒吸附后，或高倍稀释病毒－－细胞培养物，或以抗病毒抗血清处理病毒－－细胞培养物以建立同步感染，然后继续培养，定时取样测定培养物中的病毒效价，并以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线，即一步生长曲线。 高浓度敏感细菌 适量噬菌体 相混合一定时间 (5min) 除去游离噬菌体 进行高倍稀释 培养 定时取样测定噬菌体数 测定噬菌体生长的方法 潜伏期 裂解 期 平稳期 隐晦期 病毒繁殖的一步生长曲线 1、潜伏期：从噬菌体吸附到细胞，到释放出新噬菌体的最短时期。 在潜伏期的前一段，受染细胞内检测不到感染性病毒，后一阶段，感染性病毒在受染细胞内的数