两种海水鱼piscidinlike抗菌肽基因克隆、序列分析及piscidins家族系统进化研究.pdfVIP

中交擒蘩 中文摘要 抗菌肽(antimicrobial peptides，AMPs)是一类具有广谱抗微生物活性的天 然小肽类物质，是先天免疫系统中重要的非特异性免疫因子。Piscidin一词最 striped 欧洲狼鲈(Dicentrarchus 多肽结构和功能，为Q一螺旋、带正电荷、两性亲和多肽，可以统称为piscidin。 akaara) 本论文以我国重要的海水经济养殖鱼类一赤点石斑鱼(Epinep,Selus 和大黄鱼(Pseudosciaenacrocea)为研究对象，克隆得到两种鱼类的piscidin 类抗菌肽基因，并分析其氨基酸序列组成和次级结构特点，与piscidin家族其 他成员进行多序列院对，并建立系统进化树，研究结果如下： 鱼的头肾和脾脏扩增出piscidin-like抗菌肽序列，并进行序列分析和蛋白特性 预测，结果显示赤点石斑鱼piscidin为带正电荷的两亲性a一螺旋结构，成熟肽 碳末端具有强阳离子四肽的RRRH结构，与斜带石斑鱼成熟肽碳末端一致，这种 结构有利于提高与细菌胞膜的结合能力，与piscidins家族其他抗菌肽序列相似 肽家族的特征，表明从赤点石斑鱼头肾和脾组织克隆得到的piscidin-1ike抗菌 肽基因是piscidin基因变体，属于piscidins家族的新成员。 头肾和脾脏扩增逝p主seid主n—like抗菌肽序列，并进行序列分析和蛋白特性预 测，结果显示大黄鱼piscidin成熟肽为带正电荷的两亲性a一螺旋结构，成熟肽 碳末端没有石斑鱼类的RRRH结构，正电荷值比赤点石斑鱼piseidin低，优势域 碳末端也没有鲈鱼类的XQQ模块，与piscidins家族其他抗萤肽序列相似性 审交耩要 体，属乎piscidins家族的新成员。 具有嵩度序列同源性，说明生物体缩构与功能的黼度统一。荆用MEGA4．O软件 绘制了Piscidin抗菌肽家族与其它镳类抗菌肽家族的系统进化挝，验证了从券 熹善褒叁藕大黄鱼竟陵褥舞藩基魏瘸子鱼类piscidin魏蓥敦基嚣，量piseidin 家族抗黼敝基因自成～簇，与鱼类hepcidin抗黼脓家族相互戮分。 关键词#Piscidin，抗菌肽，券点石斑鱼，大黄鱼 Absu置ct Abstract As bactericidal antimicrobial broad—spectrum activity， possessing immune in thecrucialrolesininnate tested peptides(AMPs)play system animals．Piscidinis describedasa antibioticderived initially peptide frommastcel1of thelaterresearchesrevealed hybrid—stripedbass，and that fromflat from pleurocidins fishes，moronecidinhybrid—striped fromsea from bass，dicentracinbass，epinecidin一1orange—spotted simi and