干细胞移植对mcao模型鼠脑组织mir-34a及survivin表达的影响-effects of stem cell transplantation on mir - 34a and survivin expression in mcao model rats brain tissue.docxVIP

干细胞移植对 MCAO 模型鼠脑组织 miR-34a 及Survivin 表达的影响 论文作者签名: 指导教师签名: 论 文 评 阅 人 1 ：评阅人 2： 评阅人 3：答辩委员会主席：委员 1： 委员 2： 委员 3： 委员 4： 委员 5： 委员 6：答 辩 日 期 ：年月日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含 其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学 位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文 中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：年月日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读硕士学位期间在导师指导下完成的学位 论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它单位的 名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分 内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省 有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士学位论文全 文数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相 关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文 全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解 密后适用该授权。作者签名：导师签名：年月日年月日干细胞移植对MCAO模型鼠脑组织miR-34a及Survivin表达的影响摘要：目的：研究缺血再灌注损伤后大鼠脑组织miR-34a、Survivin的表 达水平，探讨BMSCs移植的抗凋亡和神经保护作用。方法：1.构建模型：选取体重约250-300g左右的健康雄性SD大鼠， 采用改良Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middlecerebral artery occlusion, MCAO) 再灌注模型。2.成功模型的判定：5分制评分法评 分，1-3分的为造模成功模型，TTC染色验证脑组织梗死范围。3.实验 分组：符合实验纳入条件的大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、 PBS液移植组、干细胞移植组。干细胞移植组和PBS液移植组于造模 成功后分别通过尾静脉注射1ml（含有l×l06个）骨髓间充质干细胞和 1ml PBS液，B组造模后无特殊处理，A组不做处理。各组分别于造模 成功后12h、1d、3d、7d观察相关指标的变化。4.观测指标：改良大 鼠神经功能缺损评分（mNSS）评估神经功能缺损；免疫组化检测 Survivin的表达；实时荧光定量PCR技术检测miR-34a的表达。结果：1.根据5分制评分法评估，造模成功率为72.22%。最终可 用于相关指标检测的实验动物成功率为54.17%。2.神经功能缺损评分 显示：在12h、1d、3d、7d时间点，空白对照组：0±0.00；模型对照 组：9.83±2.04、15.17±1.47、12.17±2.23、10.83±1.47；PBS液移 植组：9.67±1.97、15.00±1.67、12.00±2.10、11.00±2.37；干细胞 移植组：10.00±2.53、13.33±2.16、8.33±1.21、6.83±0.75。模型组、IPBS液移植组、干细胞移植组在各时间点均高于空白对照组（P0.01）；模型组与PBS液移植组比较无明显差异（P0.05）；12h、1d时干细胞 移植组与模型组、PBS液移植组比较无明显差异（P0.05）；3d、7d 时干细胞移植组明显低于模型组和PBS液移植组（P0.05）。3.免疫 组化结果显示：Survivin阳性细胞率(%)在12h、1d、3d、7d时间点， 空白对照组：0±0.00；模型对照组：11.00±2.61、19.17±3.76、31.00±3.03、13.00±2.61；PBS液移植组：10.67±2.16、20.00±3.46、32.33±4.18、14.33±3.14；干细胞移植组：16.33±2.16、29.00±5.48、44.83±3.76、25.00±4.60。模型组、PBS液移植组、干细胞移植组在各时 间点均明显高于空白对照组（P0.01）；模型组与PBS液移植组无明 显差异（P0.05）；干细胞移植组在各时间点均显著高于模型组和PBS 液移植组（P0.05）。4.实时荧光定量PCR结果显示：miR-34a表达量 在12h、1d、3d、7d时间点，空白对照组：1.1187±0.1241；模型对照 组：4.7698±0.2569、3.7305±0.2985、