仪器分析课件chap2.1 色谱分析导论讲解材料.pptVIP

一、色谱分析法简介 二、色谱分析法分类 三、 色谱图及色谱图中的基本术语 四、描述分配过程的参数 五、色谱法的基本理论 六、分离度及色谱分离方程;第二章 （一）色谱分析法概论;1、色谱法的产生 色谱法是一种分离技术，它是俄国植物学家茨维特1906年创立的。; 随着被分离样品种类的增多，该方法广泛地用于无色物质的分离，“色谱”名称中的“色”失去了原有的意义，但“色谱”这一名称沿用至今。;3. 色谱法发展历程;1957年：Golay首先应用小口径毛细管柱进行色谱分离实验，结果证明了它具有高分辨率和高效能 ——即为今日的高效气相色谱法。;;（1）柱色谱： 填充柱色谱—固定相填充在色谱柱中 毛细管柱色谱—把固定相涂在毛细管内壁上，中间是空的。 （2）纸色谱： 滤纸为固定相的色谱法，流动相是含一定比例水的有机溶剂，样品在滤纸上展开进行分离。 （3）薄层色谱： 将固体吸附剂粉末制成薄层作固定相的色谱法。;薄板层析实验演示;（1）吸附色谱：利用吸附剂表面对被分离的各组分吸附能力不同进行分离。 （2）分配色谱：利用不同组分在两相分配系数或溶解度不同进行分离。 （3）离子交换色谱：利用不同组分对离子交换剂亲和力不同进行分离。 （4）凝胶色谱：利用凝胶对分子的大小和形状不同而产生不同的阻碍作用，从而达到分离的目的。 ;三、 色谱图及其基本术语;混合组分的分离过程及检测器对各组分在不同阶段的响应; ;基线—在实验操作条件下，色谱柱后没有组分进入检测器时流出的曲线叫基线。理想情况下为一条直线。;色谱峰的高度h—色谱峰最高点与基线之间的距离，可用mm, mV, mA表示。峰的高低与组分浓度有关，峰越高、越窄越好。 ;;峰底宽Wb（Y） —色谱峰两侧拐点所作切线在基线上的距离 Wb =4 σ 半峰宽W1/2 （Y1/2） 峰高一半处色谱峰的宽度 W1/2 =2.354 σ ; 保留值： 表示试样中各组分在色谱柱中的滞留时间。 组分在色谱柱中停留的数值，可用时间t和所消耗流动相的体积V来表示。;（1）死时间tM :不被固定相吸附或溶解的组分流经色谱柱所需的时间。;(2)保留时间tR ： ;（3）调整保留时间tR： 扣除了死时间的保留时间。tR= tR? tM，又称校正保留时间，实际保留时间。 tR体现的是组分在柱中被吸附或溶解的时间。;保留值用体积表示： （4）死体积VM (V0): 不被固定相滞留的组分流经色谱柱所消耗的流动相体积称死体积。 对GC来说，即载气在色谱柱中所占的体积。 VM = t MF0 F0: 柱后出口处流动相的体积流速mL/min ;（5）保留体积VR —组分从进样开始到色谱柱后出现最大值时所需流动相体积，即组分通过色谱柱时所需流动相体积。 VR =t RF 0 （6）调整保留体积VR —扣除了死体积之后的保留体积，即将待测组分从固定相中被携带出柱子真正所需的流动相体积。 VR = tRF 0 =VR—VM;（7）相对保留值γ2,1或?： 在相同操作条件下，组分2对另一参比组分1的调整保留值之比。 ;练习;四、描述分配过程的参数;四、描述分配过程的参数;2. 分配比(k)：;分配比 k 的求算(可通过实验测得)： 1）组分滞留因子： 2）又，组分和流动相通过色谱柱所需的时间 3）因此， ;3. K 与 k 的关系： ? 称为相比，它也是反映色谱柱柱型特点的参数。 对填充柱，? = 6~35；对毛细管柱， ? = 50~1500。 4. 选择因子? ： 色谱柱对A、B两组分的选择因子?定义如下： A为先流出的组分，B为后流出的组分。;注意： ★K 或 k 反映的是某一组分在两相间的分配, 而 ? 是反映两组分间的分离情况！ ★当两组分 K 或 k 相同即? =1 时，两组分不能分开； 当两组分 K 或 k 相差越大时, ? 越大, 分离得越好。 也就是说，两组分在两相间的分配系数不同，是色谱分离的先决条件。 其中? 和 k 是计算色谱柱分离效能的重要参数！;五、色谱法的基本理论;塔板理论假定： 1）塔板之间不连续； 2）塔板之间无分子扩散； 3）组分在各塔板内两相间的分配瞬间达至平衡， 达一次平衡所需柱长为理论塔板高度H； 4）组分