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第六章 微生物遗变异与育种 第一节 遗传变异的物质基础 第二节 微生物的基因和基因组 第三节 质粒和转座因子 第四节 基因突变及遗传育种 第五节 微生物的基因工程 第六节 菌种的衰退、复壮与保藏 遗传与变异的概念 遗传：亲代将自身一整套遗传因子传递给下一代的行为和功能。 变异：生物体的遗传物质结构和数量的改变，新性状稳定、可遗传。 遗传型（genotype）：一个生物体所含有的基因的总和。 表型（phenotype）：一个生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和。 饰变（modification）：指生物体由于非遗传因素引起的表型改变，变化发生在转录、转译水平，特点是几乎整个群体中的每一个个体都发生同样的变化，性状变化的幅度 小，不遗传，引起饰变的因素消失后，表型即可恢复。 第一节 遗传变异的物质基础 一、证明遗传物质的三个经典实验 1、转化实验——遗传物质是DNA 2、噬菌体感染实验——证明DNA是遗传物质，且其中含有合成蛋白质的遗传信息 。 3、植物病毒重建实验——遗传物质是RNA。 1、肺炎链球菌转化实验 2、T2噬菌体感染实验（A.D.Hershey和M.Chase 1952年） 3、病毒重建实验(Fraenkel—Conrat 1956年) 第二节 微生物的基因和基因组 一、概念和微生物的基因结构 基因是一段具有特定功能和结构的连续的DNA片段，是编码蛋白质或RNA分子遗传信息的基本遗传单位。 完整的基因包括编码区5′末端和3 ′末端长度不等的特异性序列 基因组（genome）：一个物种的单倍体的所有染色体及其所包含的遗传信息的总称。 原核生物（如细菌），多为单倍体（在一般情况下只有一条染色体）。 真核微生物，多条染色体，例如啤酒酵母有16条染色体。有时为双倍体。 1、原核微生物基因的结构 （1）、编码区：所有的微生物基因都有一个编码区，依基因类型的不同，或是编码一种蛋白质多态或是编码一种RNA结构。 （2）、启动子：位于5′末端上游外侧紧靠转录起点的一段长20～200bp的非编码的核苷酸序列。其功能是与RNA聚合酶结合形成转录起始复合物。 （3）、终止子：位于一个基因或一个操纵子的末端，提供转录终止信号的DNA区段。与启动子不同的是可被RNA聚合酶转录成mRNA。 转录单元：指由启动子、结构基因及终止子组成的一段DNA顺序。如功能上相关的几个结构基因前后相连，利用一个共同的启动子和终止子，这种转录单元被称为操纵子。 2、真核基因的结构 许多真核微生物基因的编码序列在DNA分子上是不连续的，被一种叫做内含子的非编码序列所间断。 （1）、外显子：在mRNA上出现的编码序列，并代表蛋白质的DNA序列。 （2）、内含子：从mRNA中消失的DNA不编码序列。 TATA盒：真核生物编码蛋白质基因的启动子具有两个高度保真的共有序列，即-25～-35区含有TATAA序列。 一部分DNA序列能增强或减弱真核基因转录起始频率，这些区域称为增强子和沉默子 2、真核基因的结构 （3）、增强子：能使和它相连锁的基因转录频率明显增强的DNA序列，长度一般为100～200bp。 （4）、沉默子：属于负调控元件，可不受距离和方向的限制，并可对异源基因的表达起作用。 二、微生物基因组结构的特点 1、原核生物（细菌、古生菌）的基因组 1）染色体为双链环状的DNA分子（单倍体）； 2）基因组上遗传信息具有连续性； 3）功能相关的结构基因组成操纵子结构； 4）结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝； 5）基因组的重复序列少而短； 二、微生物基因组结构的特点 2、真核微生物（啤酒酵母）的基因组 1）典型的真核染色体结构； 2）没有明显的操纵子结构； 3）有间隔区（即非编码区）和内含子序列； 4）重复序列多； 第三节 质粒和转座因子 质 粒 定义：是一类小型共价闭合环状核外DNA，能独立于细胞核进行自主复制。可以通过交换掺入细胞核成为附加体；可以从寄主细胞中消除。 大小：2～100×106Da，含有数个到数十个甚至上百个基因。 性质：质粒是一种复制子，分为严紧型和松弛型，严紧型质粒的复制受细胞核控制，一般一个寄主细胞内有2～3个；松弛型质粒的复制不受细胞核控制，在细胞内的数量可以达到10～15 个 功能：进行细胞间接合并带有一些基因，如产生毒素、抗药性、降解功能等。 重组：在质粒之间、质粒与染色体之间菌可发生。 质粒的主要类型 1、F-因子（fertility factor） 致育因子/性因子，62×106Dalton，94.5kb，相当于核染色体DNA2%的环状双链DNA，足以编码94个中等大小多肽，其中1/3基因（tra区）与接合作用有关。 存在于肠细菌属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏