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第六章__微生物遗传变异和育种
第六章 微生物遗变异与育种 第一节 遗传变异的物质基础 第二节 微生物的基因和基因组 第三节 质粒和转座因子 第四节 基因突变及遗传育种 第五节 微生物的基因工程 第六节 菌种的衰退、复壮与保藏 遗传与变异的概念 遗传:亲代将自身一整套遗传因子传递给下一代的行为和功能。 变异:生物体的遗传物质结构和数量的改变,新性状稳定、可遗传。 遗传型(genotype):一个生物体所含有的基因的总和。 表型(phenotype):一个生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和。 饰变(modification):指生物体由于非遗传因素引起的表型改变,变化发生在转录、转译水平,特点是几乎整个群体中的每一个个体都发生同样的变化,性状变化的幅度 小,不遗传,引起饰变的因素消失后,表型即可恢复。 第一节 遗传变异的物质基础 一、证明遗传物质的三个经典实验 1、转化实验——遗传物质是DNA 2、噬菌体感染实验——证明DNA是遗传物质,且其中含有合成蛋白质的遗传信息 。 3、植物病毒重建实验——遗传物质是RNA。 1、肺炎链球菌转化实验 2、T2噬菌体感染实验(A.D.Hershey和M.Chase 1952年) 3、病毒重建实验(Fraenkel—Conrat 1956年) 第二节 微生物的基因和基因组 一、概念和微生物的基因结构 基因是一段具有特定功能和结构的连续的DNA片段,是编码蛋白质或RNA分子遗传信息的基本遗传单位。 完整的基因包括编码区5′末端和3 ′末端长度不等的特异性序列 基因组(genome):一个物种的单倍体的所有染色体及其所包含的遗传信息的总称。 原核生物(如细菌),多为单倍体(在一般情况下只有一条染色体)。 真核微生物,多条染色体,例如啤酒酵母有16条染色体。有时为双倍体。 1、原核微生物基因的结构 (1)、编码区:所有的微生物基因都有一个编码区,依基因类型的不同,或是编码一种蛋白质多态或是编码一种RNA结构。 (2)、启动子:位于5′末端上游外侧紧靠转录起点的一段长20~200bp的非编码的核苷酸序列。其功能是与RNA聚合酶结合形成转录起始复合物。 (3)、终止子:位于一个基因或一个操纵子的末端,提供转录终止信号的DNA区段。与启动子不同的是可被RNA聚合酶转录成mRNA。 转录单元:指由启动子、结构基因及终止子组成的一段DNA顺序。如功能上相关的几个结构基因前后相连,利用一个共同的启动子和终止子,这种转录单元被称为操纵子。 2、真核基因的结构 许多真核微生物基因的编码序列在DNA分子上是不连续的,被一种叫做内含子的非编码序列所间断。 (1)、外显子:在mRNA上出现的编码序列,并代表蛋白质的DNA序列。 (2)、内含子:从mRNA中消失的DNA不编码序列。 TATA盒:真核生物编码蛋白质基因的启动子具有两个高度保真的共有序列,即-25~-35区含有TATAA序列。 一部分DNA序列能增强或减弱真核基因转录起始频率,这些区域称为增强子和沉默子 2、真核基因的结构 (3)、增强子:能使和它相连锁的基因转录频率明显增强的DNA序列,长度一般为100~200bp。 (4)、沉默子:属于负调控元件,可不受距离和方向的限制,并可对异源基因的表达起作用。 二、微生物基因组结构的特点 1、原核生物(细菌、古生菌)的基因组 1)染色体为双链环状的DNA分子(单倍体); 2)基因组上遗传信息具有连续性; 3)功能相关的结构基因组成操纵子结构; 4)结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝; 5)基因组的重复序列少而短; 二、微生物基因组结构的特点 2、真核微生物(啤酒酵母)的基因组 1)典型的真核染色体结构; 2)没有明显的操纵子结构; 3)有间隔区(即非编码区)和内含子序列; 4)重复序列多; 第三节 质粒和转座因子 质 粒 定义:是一类小型共价闭合环状核外DNA,能独立于细胞核进行自主复制。可以通过交换掺入细胞核成为附加体;可以从寄主细胞中消除。 大小:2~100×106Da,含有数个到数十个甚至上百个基因。 性质:质粒是一种复制子,分为严紧型和松弛型,严紧型质粒的复制受细胞核控制,一般一个寄主细胞内有2~3个;松弛型质粒的复制不受细胞核控制,在细胞内的数量可以达到10~15 个 功能:进行细胞间接合并带有一些基因,如产生毒素、抗药性、降解功能等。 重组:在质粒之间、质粒与染色体之间菌可发生。 质粒的主要类型 1、F-因子(fertility factor) 致育因子/性因子,62×106Dalton,94.5kb,相当于核染色体DNA2%的环状双链DNA,足以编码94个中等大小多肽,其中1/3基因(tra区)与接合作用有关。 存在于肠细菌属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏
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