猪链球菌的分离鉴定 猪病防治课件幻灯片课件.pptVIP

猪链球菌的分离鉴定 一、实训目的 掌握猪链球菌的分离鉴定方法 二、实训器材 疑似猪链球菌病猪、血液琼脂平板、普通琼脂平板、麦糠凯琼脂平板，10%鸡血清肉汤培养基、糖发酵培养基、接种环、酒精灯、剪刀、镊子、载玻片、显微镜、小白鼠等。 三、实训方法 1、病料的采集 无菌采患关节炎病猪的关节液，无菌采集急性死亡的病猪肝、肺、脾、脑及颌下淋巴结等病料 。 2、涂片镜检 制作肝脏、肺脏、脾脏的触片，用关节液涂片，干燥、火焰固定后进行革兰氏染色镜检。可见革兰氏阳性双球菌或短链状 球菌。  3、分离培养 无菌采集的肝、肺、脾及淋巴结、关节液等病料分别划线接种鲜血琼脂（加入5%无菌的绵羊血液）平板，37℃培养24～48小时后，观察菌落特征，选取鲜血琼脂平板上微小、圆形、边缘整齐、略带灰白色、露滴样、有明显的β型溶血环的单个菌落的小部分革兰氏染色、显微镜检查呈成对或短链状革兰氏阳性球菌后，菌落的其余部分再分别接种于普通琼脂斜面培养基、血清肉汤培养基、营养肉汤培养基及普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板上，置37℃温箱内培养24～48小时，获得分离菌的纯培养物及在不同培养基上的生长情况。 猪链球菌的培养特征 37℃培养24小时后，在鲜血琼脂平板上形成半透明、表面光滑、微隆起的灰白色露珠状的小菌落，外层有明显的β溶血环，生长良好;在普通琼脂平板和麦康凯琼脂平板上菌落贫瘠;在10％鸡血清肉汤中培养48h后，可见管底形成絮状沉淀，上液澄清，无菌膜和菌环。染色镜检：革兰氏阳性球菌，固体培养基中的呈3～5个连成链排列，液体培养基中的则呈4～8个连成链排列，或者更长。