天美公司lc2000高效液相色谱仪水行业.pptxVIP

液相历史现状简介经典的液相色谱制备色谱的雏形液相色谱的简史及现状（一）液相色谱的雏形 薄层色谱1、早在古罗马时期，人们就知道将一滴混合色素的溶液滴在一块布或一张纸上，观察溶液展开产生的一个个同心圆来分析染料和色素。2、1906年，俄国植物学家茨维特使用图所示的装置分离绿叶素，柱管是采用碳酸钙，溶剂加在上端，在地球引力的作用下迁移，而组分的检测则依靠肉眼的观察。20多年后，人们又成功地用液相色谱证实了蛋黄内的叶黄素是植物叶黄素和玉米黄的混合物，这就是今天制备色谱提纯的雏形第一台液相色谱的诞生液相色谱的现状液相色谱的简史及现状（二）1960年代末世界上第一台液相色谱诞生，开启了液相色谱的时代。 采用高压泵输送流动相代替重力作用，使柱效率提高，加快分析速度；而柱分离技术与光学检测器相结合也使得液相色谱由最初的以分离目的为主发展成为可以同时完成分离分析目的的重要分析方法。1960年代，由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性，为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质，气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱，研制成功多种细粒度高效填充柱，大大提高了液相色谱的分离能力。1、食品安全、药品安全、环境卫生、生命科学等都需要液相色谱2、液相色谱占全世界分析仪器市场销售总额近20%，而且每年按10%左右的增长率稳步上升。3、液相色谱的发展朝着更加自动化，智能化、和其它仪器联用技术方向发展，比如液相和质谱联用，液相和红外联用，以利于更快速、更准确的定性、定量分析。气相色谱理论的引入LOCK OFFBeLOCK OFF!溶剂箱检测器LOCK OFF自动进样器高压泵单元OUTCDABIN液相色谱的简史及现状（三）液相色谱整体及概念液相色谱的流程图—梯度篇比例电磁阀输液泵在线脱气混合器排放阀流动相保护柱分析柱六通阀检测器废液瓶液相色谱的基本概念（一）高压液相色谱液相色谱的叫法高分离度液相高速液相色谱高效液相色谱气相色谱液相色谱液相色谱的几个重要概念（二）一、液相色谱和气相色谱的区别 主要是通过改变流动比例，改变流动相的洗脱强度，从而达到分离，色谱柱最常用的是C18这一类柱，还有氨基柱、氰基柱等，色谱柱种类少。分析对象 适用分离大分子量的，低挥发性或不挥发、热稳定性差的物质，如食品添加剂、色素、苏丹红等等 主要是通过色谱柱的不同极性来进行分离，从非极性到中等极性，再到强极性，做一类样品需要一根专用的色谱柱，所以有很多的色谱柱，使用成本较高。 适用分离分子量小的，挥发性化合物。如蔬菜、水果中有机磷的农药残留，茶叶中有机氯，引用水中三氯甲烷、四氯化碳检测分离的形式既可以分析气体，也可以分析液体样品形式样品形式为：液体正相色谱反相色谱固定相区别出峰顺序液相色谱的几个重要概念（三）分析对象 常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）固定相为极性的，流动相为非极性（如氨基柱、氰基柱，流动相为正己烷、环己烷等，常加入乙醇、异丙醇等以调节组分的保留时间适用于分离非极性和弱极性的化合物，此种色谱应用最为广泛，它占整个液相色谱应用的80%左右。固定相为非极性的（C18、C8），流动相极性的(如水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈等有机溶剂调节保留时间极性小物质先出峰。极性大的物质先出峰。梯度和等度的区别（四）梯度模式等度模式LOCK OFFLOCK OFFBeBeLOCK OFFLOCK OFF!!溶剂箱检测器溶剂箱检测器柱温箱LOCK OFFLOCK OFF泵2 自动进样器自动进样器泵 1高压泵单元OUTOUTOUTACCCDDDAABBBINININ高压梯度和低压梯度的区别（五）高压梯度低压梯度高压梯度和低压梯度的区别（五）工作过程缺点：LOCK OFF1、高压梯度需使用多台高压输液泵，流动相需要变化几种组分即需要几台高压输液泵，即所说的几元梯度，如二元梯度需要两台输液泵，三元需要三台泵，成本高。 2、梯度曲线与设定值可能会存在一定的滞后和偏离，因为大部分液体的压缩性为每增加105 Pa压力导致0.01%~0.015%的体积减小，加上某些溶剂混合时还伴随着体积变化，所以会导致梯度曲线与设定值可能会存在一定的滞后和偏离。采用两个或多个高压泵将不同的溶剂分别增压后输送到同一个梯度混合器进行混合，混合后的流动相再进入进样阀和色谱柱的方法。优点BeLOCK OFF1、可获得任意形式的梯度洗脱曲线，精度高。梯度方式 可以是连续的，也可以是分段台阶式的，还可以是凹形或凸形的，实际中应用较少。 2、不同组分的溶剂在高压下混合，不易产生气泡，对流动相的脱气要求相对较低!检测器溶剂箱柱温箱LOCK OFF泵2 自动进样器泵 1OUTOUTCCDDAABBININ高压梯度和低压梯度的区别（五）高压梯度工作过程LOCK OFF优点在常压下，将不同组分的溶剂混合