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微生物培养基上
基本要求:1) 都必须含有作为合成细胞组成的原料, 如碳源、氮源、无机盐、生长因子;2) 满足一般生化反应的基本条件;3) 一定的pH等条件。适宜大规模发酵的培养基1)经济2)副产物尽可能少3)原料因地制宜、价格低廉、性能稳定、资源丰富、便于采购运输4)满足总体工艺要求第一节 培养基的类型及功能一、培养基的类型(一)按纯度1、合成培养基: 成分明确、稳定。适于科研工作,在生产疫苗时,为了防止蛋白杂质混入,也常用。 但营养单一,价格较高。不适于大规模生产。2、天然培养基: 天然动植物产品。营养丰富,适于微生物生长。 一般不需另加微量元素、维生素等物质;来源丰富、价格低廉,适于工业生产。 组分复杂,不易重复,如对原料质量等方面不加控制会影响生产的稳定性。(二)按状态1、固体培养基: 适于菌种和孢子培养和保存,也广泛应用于有子实体的真菌类。 常用麸皮、大米、小米、禾壳和琼脂等,有的还另加其他营养成分。2、半固体培养基: 即在配好的液体培养基中加入少量琼脂,一般用量为0.5-0.8%,培养基即呈半固体状态。 主要用于:鉴定菌种,观察细菌运动特征及噬菌体的效价滴定等。3、液体培养基: 80-90%是水,内含可溶或不溶营养成分,是发酵工业大规模使用的培养基,它有利于氧和物质传递。(三)按用途1、 孢子培养基 供菌种繁殖孢子用。 要求:能使菌体迅速生长,产生较多优质的孢子,不易引起菌种发生变异。 基本配制要求: 第一,营养不要太丰富(特别是有机氮源↓),否则不易产孢子。 第二,所用无机盐的浓度要适量,不然也会影响孢子产量和颜色。 第三,要注意孢子培养基的pH和湿度。 2、种子培养基 供孢子发芽、生长和繁殖菌丝体。 要求:营养丰富完全,氮源和维生素的含量高些,总浓度略稀薄,以达到较高溶解氧。 一般用天然有机氮源,因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用,有利于菌体迅速生长,所以常包括有机及无机氮源。 最后一级的种子培养基最好能较接近发酵培养基,这样可使种子迅速适应,快速生长。3、 发酵培养基 是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。既要迅速生长、又要能迅速合成产物。 因此,除有生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需元素、前体和促进剂。 生长和合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或两阶段各需的最佳条件不同时,则考虑分批补料。第二节 发酵培养基的成分及来源 工业微生物绝大部分都是异养型微生物,它需要碳水化合物、蛋白质和前体等物质提供能量和构成特定产物的需要。 一、碳源 常用碳源:糖类、油脂、有机酸和低碳醇。 葡萄糖: 最易利用,是加速生长的有效的糖。 但过多会过分加速菌体呼吸,以致溶解氧不能满足需要,使一些中间代谢物积累,pH下降,影响微生物生长和产物合成。 糖蜜: 制糖结晶母液,蔗糖厂的副产物,含丰富的糖、氮、无机盐、维生素等。主要含蔗糖,总糖可达50一75%。 甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜的成分有所不同。 糖蜜常用在酵母和丙酮丁醇的生产中,抗生素等微生物工业也常用它作碳源。 酒精生产中若用糖蜜代甘薯粉,可省去蒸煮、制曲、糖化等过程,简化了工艺。 淀粉、糊精: 淀粉在发酵工业中被普通使用,它可克服葡萄糖代谢过快的弊病,同时淀粉来源丰富,价格也比较低廉。 常用:玉米淀粉,小麦淀粉和甘薯淀粉等。 有些微生物可直接利用玉米粉、土豆粉作碳源。 纤维素和含淀粉较多的野生植物也是今后开发碳源的广阔天地。油和脂肪:脂肪作碳源时需供给比糖代谢更多的氧,否则,大量脂肪酸和代谢中的有机酸积累,pH下降,影响酶作用。 常用的油:豆油、菜油、葵花子油、猪油、鱼油、棉子油等。有机酸: 乳酸、柠檬酸、乙酸等有机酸或它的盐也能作碳源。 有机酸的利用常会使pH上升,尤其是有机酸盐氧化时,常伴随着碱性物质的产生。 不同碳源在氧化时,对pH的影响各不相同。烃和醇类: 正烷烃、乙醇等二、 氮源 A 有机氮源 常用:花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟等。 它们在微生物分泌的蛋白酶作用下,水解成氨基酸,被吸收后再进一步分解代谢。玉米浆: 易被利用的氮源,含丰富氨基酸、还原糖、磷、微量元素。含磷酸肌醇,对促进红霉素、链霉素、青霉素和土霉素的生产有作用。 玉米来源不同,加工条件不同,玉米浆的成分常有较大波动,在使用时应注意适当调配。尿素: 常用有机氮源 在青霉素、谷氨酸等生产中也常被采用。尤其是在谷氨酸生产中,尿素可提高谷氨酸的生产。 有机氮源有的还是产物的前体。B 无机氮源 常用的有:铵盐、硝酸盐和氨水等。也称为速效氮源。 无机氮源的迅速利用会引起pH的变化。生理酸性物质:硫酸铵。生理碱性物质:硝酸钠。 正确使用生理酸碱性物质,对稳定和调节发酵过程的pH有积极作用。氨水:在发酵中除可以调节pH外,它也是
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