n乙酰半胱氨酸对bde209致新生鼠海马神经元氧化损伤影响及初步探讨bde209对海马神经元dna甲基化水平影响-effect of n - acetylcysteine on oxidative damage of hippocampal neurons in neonatal rats induced by bde 209 and preliminary study on effect of bde 209 on dna methyla.docxVIP

N-乙酰半胱氨酸对BDE-209致新生鼠海马神经元氧化损伤的影响【实验目的】观察N-乙酰半胱氨酸对BDE-209致新生鼠海马神经元氧化损伤的影响。【材料与方法】1.原代培养7天的新生鼠海马神经元细胞，分成8组，即对照组和实验组，即对照组和实验组，对照组分为空白对照组（含有含1‰DMSO的培养液）和NAC对照组（含有0.1mmol/LNAC的培养液）。实验组为I组及II组，I组为BDE-209单独染毒组，其中分3个浓度小组，分别为10ug/ml组、30ug/ml组及50ug/ml组，II组为BDE-209与NAC同时作用组，也分为3个浓度小组，分别为10ug/ml组、30ug/ml组及50ug/ml，NAC浓度均为0.1mmol/L。染毒24小时后取细胞培养液进行检测。2.采用黄嘌呤氧化法测定SOD活力。3.采用硫代巴比妥酸法测定MDA含量。4.采用硝酸还原酶法测定NO含量。【结果】1.随浓BDE-209浓度的增加，在BDE-209单独染毒组及与NAC同时作用组中，SOD活力均有明显下降（P0.05）。与NAC同时作用实验组中的SOD活力比BDE-209单独染毒组中的SOD活力高，并有明显差异性（P0.05）2.在BDE-209单独染毒组中，随BDE-209浓度增加，MDA含量逐渐增加，30ug/ml组及50ug/ml组与对照组比较，均有明显差异性（P0.05）,在BDE-209单独染毒组及与NAC同时作用组之间比较，与NAC同时作用实验组中的MDA含量比BDE-209单独染毒组中MDA含量低，有明显差异性（P0.05）。3.在BDE-209单独染毒组中，随BDE-209浓度增加，NO含量均有明显增加（P0.05）,三个浓度组间相比无明显差异性（P0.05）,在BDE-209单独染毒组及与NAC同时作用组之间比较，与NAC同时作用实验组中的NO含量比BDE-209单独染毒组低，有明显差异性（P0.05）。【结论】BDE-209能引起海马神经元细胞氧化应激损伤，这可能是BDE-209的神经毒性的机制之一。而一定浓度的NAC能改善一定浓度的BDE-209引起的氧化损伤。【关键词】BDE-209；海马神经元细胞；超氧化物歧化酶（SOD）；丙二醛（MDA）；一氧化氮（NO）第三部分BDE-209对原代培养新生鼠海马神经细胞整体DNA甲基化水平的影响【目的】检测BDE-209对原代培养新生鼠海马神经元细胞整体DNA甲基化水平，以探讨BDE-209对海马神经元细胞影响的作用机制。【材料与方法】1.原代培养7天的新生鼠海马神经元细胞分5组，即对照组和实验A、B、C组（含BDE-209浓度分别为10、30、50ug/ml），对照组又分为完全空白对照组及用1‰DMSO染毒的对照组。每组设3个平行样，实验重复3次。2.提取细胞DNA3.采取酶联免疫吸附法进行整体DNA甲基化定量分析【结果】BDE-209染毒后，均引起整体DNA甲基化水平下降，其中10ug/ml组及30ug/ml组与空白组对比，有明显差异性（P0.05），10ug/ml组与DMSO对照组相比也有明显的差异性(P0.05)。随浓度增BDE-209浓度增加，整体DNA甲基化水平有所增加，10ug/ml组与50ug/ml组相比也有明显差异性。（P0.05）。【结论】一定浓度的BDE-209对海马神经元细胞的整体甲基化水平有一定影响。【关键词】BDE-209；海马神经元细胞；整体DNA甲基化水平；ProtectiveeffectsofN-acetyl-cysteineononoxidativestressinducedbyBDE-209onhippocampalneuronsandEffectofBDE-209ontheglobalDNAmethylationofhippocampalneuronsABSTRACTPolybrominateddiphenlyethers(PBDEs)areaclassofaromaticserieswhichcontainbromineatoms.From20thcentury,wefoundthatpolycholorinatedbiphenyls(PCBs)hadharmfuleffectsonhumanhealth.SoPCBswerebannedtousedasadditiveflameretardamts.PBDEsarechemicallysimilartoPCBs,andinsteadofPCBs,theyareusdasadditiveflameretardantsinavarietyofconsumerproducts..PBDEsarepersistentorganicpollutants,bioaccumulateintheenviro