日本血吸虫SjC DNA疫苗基因枪免疫小鼠诱导免疫保护作用的研究.docVIP

日本血吸虫SjC23 DNA疫苗基因枪免疫小鼠诱导免疫保护作用的研究 中国血吸虫病防治杂志2004年第16卷第6期ChinJSchistoControl2004,Vo1.16,No?6?411 [文章编号]1005—6661(2004)06—0411-06 日本血吸虫SJC23DNA疫苗基因枪免疫 小鼠诱导免疫保护作用的研究 赵 何 朱荫昌 粱幼生, ,D.A.Harn,司进,任建功,殷旭仁, 徐明,许永良 [摘要]目的研究日本血吸虫中国大陆株23kDa膜蛋白DNA疫苗基因枪免疫诱导BALB/c小 鼠产生的抗血吸虫感染作用.方法6O只雌性BALB/c小鼠随机分为6组:pcDNA3.1组(对照 组),每只小鼠用基因枪经腹部皮肤免疫pcDNA3.1质粒DNA2次,共2g;SJC23基因枪(gg)组, 每鼠用基因枪免疫pcDNA3.1-SJC23质粒DNA2g;SJC23肌注(im)组,每鼠肌注100gpcD- NA3.1-SJC23质粒DNA;SjC23/CpG(gg)组,每鼠用基因枪免疫pcDNA3.1一SjC23/CpG质粒DNA 2btg;SjC23/CpG(im)组,每鼠肌注i00gpcDNA3.1-SjC23/CpG质粒DNA;联合免疫组,每只小鼠 先肌注100gpcDNA3.1-SjC23/CpG质粒DNA,第2天用基因枪免疫2g.各组小鼠隔2周加强 免疫1次,共3次.末次免疫后4周每鼠经腹部皮肤攻击感染(45±1)条日本血吸虫尾蚴,45d后剖 杀,计数成虫及肝脏虫卵数.首次免疫前2天及感染前2天经尾静脉采血检测IgG抗体水平及抗体 亚类IgG,IgGz..末次免疫后3周检测脾细胞经ConA和rSjC23一HD刺激后培养上清中鼠IL一2,IL一 4和IFN-7的水平.结果SJC23(gg)组,Sjc23/cpG(gg)组及联合免疫组小鼠所检成虫数均低于对 照组(P均lt;O.01),减虫率分别为19.57,25.38和32.31;SJC23(gg)组,SJC23/CpG(gg)组及 联合免疫组小鼠检获虫卵数均低于对照组(P均lt;0.05),减卵率分别为16.92,19.56和 27.73.SJC23(im)组和SjC23/CpG(im)组分别获得了28.O7%和35.14的减虫率及21.56%和 26.52%的减卵率.抗体检测结果,SJC23(gg)组,SjC23/CpG(gg)组,SJC23(im)组,SjC23/CpG(im) 组和联合免疫组均诱导小鼠产生了特异性IgG抗体.SJC23(gg)组IgG的A值为0.102,而IgG 几乎检测不到;SjC23/CpG(gg)组IgG2/IgG比值为2.01;联合免疫组IgG2/IgG比值为5.18; SJC23(im)组和SjC23/CpG(im)组IgG2/IgG的比值分别为1O.O6和12.15.脾细胞经ConA和 rSjC23一HD刺激,联合免疫组检测到较高水平的IL一2.SJC23(gg)组小鼠脾细胞经特异及非特异性抗 原刺激均产生较高水平的IL一4.脾细胞经ConA刺激,IFN一7的水平SjC23/CpG(gg)组较SJC23 (gg)组有所升高.结论SJC23DNA疫苗通过基因枪免疫也能产生部分免疫保护作用,但明显低于 肌肉注射的方法. [关键词]日本血吸虫;免疫刺激序列;DNA疫苗;23kDa膜蛋白;基因枪 [中圈分类号]R383.24[文献标识码]A PROTECTIVEIMMUNERESPONSEINDUCEDWITHpcDNA3.1-SJC23IMMUNIZEDBY GENEGUNINBALB/cMICEZhaoSong,ZhuYinchang*,D.A.Harn,SiJi,RJi口一 gong,YinXuren,HeWei,LiangYousheng,XuMing,XuYongliang(1JiangsuInstituteof ParasiticDiseases,JiangsuProvincialKeyLabonMolecularBiologyofParasites,Wuxi214064, China;2HarvardSchoolofPublicHealth,Boston,MI,USA)Correspondingauthor. [-Abstract-]ObjectiveTostudytheprotectiveeffectofSJC23DNAvaccineagainstSchistosoma japonicuminfectionimmunizedbygenegun.MethodsSixtyBALB/cmiceweredividedinto6 groupsrandomly.Themiceincontrolgroupwereimmunizedwithp