结直肠癌患者外周血CRD—BPRNA表达的探索性研究.pptVIP

结直肠癌患者外周血CRD-BP RNA表达的探索性研究 宁夏医学院附属医院 尹莉 宁夏回族自治区自然科学基金项目编号NZ0552 研究背景 大肠癌的发病现状 全球结直肠癌每年发病新病例数达94万，每年近50万人死于结直肠癌。结直肠癌死亡居癌症死因第3位。结直肠癌在我国也是最常见的恶性肿瘤之一，目前居恶性肿瘤发病率第4位。近年来，结直肠癌的发病率呈明显上升趋势，此趋势在大中城市较明显。结直肠癌发病与生活方式的改变及膳食结构不合理密切相关。随着人们生活方式、饮食结构的改变、期望寿命的提高，大肠癌的发病率还将进一步提高。 研究背景TNM分期与结直肠癌存活率的关系 研究背景 结直肠癌的初治诊断分期，Ⅰ期占15%，Ⅱ期占20～30%，Ⅲ期占30～40%，Ⅳ期占20～25%。 根据2006年9月出版的《中国肿瘤临床年鉴》，2006年我国26所省级肿瘤医院共有140732人接受了肿瘤手术，住院病人共有375447人次，门诊病人314万人次。 结直肠癌发病率持续上升 结直肠癌 不稳定编码区结合蛋白（Coding Region instability Determinant-Binding Protein，CRD-BP）。 1992年Berstein PL等国外学者发现CRD-BP 。 1997年Rossa 基因定位(17号染色体的q21.3 )。 CRD-BP 在c-myc基因中发现的第一个遮盖蛋白。 CRD-BP受生长发育调节，正常情况下，CRD-BP只在胚胎组织中表达，在成体组织中表达被抑制 . 既往组织病理的研究发现，CRD-BP是一个癌胚蛋白,在乳腺癌、小细胞肺癌、结直肠癌中表达或过表达，因此有可能成为新的特异肿瘤标志物。 c-myc基因 本课题通过检测探讨CRD-BP RNA在结直肠癌、良性肠道疾病及正常人群外周血的表达情况，探讨其在结直肠癌早期诊断、判断预后的临床价值。 材料和方法 结直肠癌实验组纳入标准 实验组临床特征 实验组临床特征 实验组临床特征 试验方法 荧光定量巢式RT-PCR （FQ-nRT-PCR） 实验操作步骤 结 果 样本总RNA的提取质量和纯度 图中28s、18s二条清晰的条带 和稍欠清晰的5s条带，说明提 取的RNA样品纯度较高，完整 性较好，无DNA污染，无降解。 图1 RNA提取结果 定性检测结果 M: DNA marker 0: RNA fragment amplified from samples (negative) 1-10：CRD-BP RNA fragment amplified from samples (positive) Inner 图2 结直肠癌外周血CRD-BP RNA检测阳性样本电泳图 CRD-BP RNA阳性样本的动力曲线 图3荧光定量PCR检测样本CRD-BP RNA动力曲线图 CRD-BP RNA在结直肠癌患者及对照组的表达 CRD-BP RNA在结直肠癌不同Dukes分期中的表达水平的比较 CRD-BP RNA在有无淋巴结转移结直肠癌患者中的表达水平的比较 与无淋巴结转移患者比较 * P0. 05 讨 论 CRD-BP RNA在结直肠癌患者外周血中的阳性表达率为31. 25%（10/32），20健康体检者和15例良性结直肠疾病患者外周血中均未检出，差异具有统计学意义(P0. 05)，提示CRD-BP RNA有可能成为新的结直肠癌肿瘤标记物，用于临床诊断。 CRD-BP RNA在不同年龄、不同性别结直肠癌患者外周血中的表达差异无统计学意义（P0. 05）， 提示CRD-BP RNA表达与以上两个因素无关。 CRD-BP RNA在不同分化程度、不同浸润深度、不同肿瘤大