血浆蛋白酶ct-like活性与前列腺癌恶性程度的相关性研究-correlation between ct - like activity of plasma protease and malignancy of prostate cancer.docxVIP

中英文对照词表英文缩写英文全称中文全称PCAprostatecancer前列腺癌CT-LChymotrypsin-like胰糜蛋白酶样T-LTrypsin-like胰蛋白酶样C-Lcaspase-like半胱天冬酶样DMEMDulbecco’sModifiedEagleMedium培养基E1ubiquitinactivatingenzyme泛素激活酶E2ubiquitinconjugatingenzyme泛素公轭酶E3ubiquitinligase泛素连接酶FCMFlowcytometry流式细胞术FDAFoodandDrugAdministration美国食品和药物管理局Hsp70heatshockprotein热休克蛋白70ODopticalDensity光密度SDSSodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠SDSSDSpolyacrylamideGelelectrophoresisSDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳TEMEDtetramethylhylenediamine四甲基乙二酸UPSubiquitin-proteasomesystem泛素-蛋白酶体系统Ububiquitinatedprotein泛素化蛋白1血浆蛋白酶（CT-like）活性与前列腺癌恶性程度的相关性研究研究生：吴思锋导师：汤平主任医师、教授中文摘要背景与目的泛素-蛋白酶体系统(UPS)是细胞内主要的蛋白质降解系统，介导了细胞内多种蛋白的降解，参与细胞重要生命过程的调节。当泛素一蛋白酶体系统对靶蛋白的降解功能失常时，可以引起癌蛋白聚集、抑癌蛋白异常降解、突变细胞凋亡受阻和增殖加速，从而导致肿瘤的发生。我们前期的研究发现，在前列腺癌患者PC-3细胞株和异体移植物里，通过抑制蛋白酶（CT-like）活性会导致泛素化蛋白聚集，最后诱导PC-3细胞死亡。UPS调控蛋白酶体活性、UPS与前列腺癌的诊断是目前研究的热点。本研究在前期研究基础上进一步探讨CT-like活性与前列腺癌恶性程度之间的关系。材料和方法收集广州市第一人民医院2012年11月到2013年9月疑似前列腺癌患者的血液标本和前列腺穿刺活检的前列腺组织。根据DAmico标准，患者活检后分为三组（非癌组，低危组和高危组前列腺癌）。使用荧光肽对三种不同的蛋白酶体活性（CT-like,Caspase-like和Trypsin-like）进行检测并比较三组之间的差异。用多因素Logistic回归分析来确定哪些变量能预测前列腺癌的危险分层（CT-like活性和直肠指检为分类变量，年龄，前列腺特异性抗原（PSA），和前列腺体积作为连续变量）。用t检验来比较的非癌组、低危组和高危组前列腺癌中蛋白酶2体活性的差异。结果1.109例前列腺穿刺活检患者的血浆CT-like活性的中位数值为55，发现蛋白酶（CT-like）活性在非癌组、低危组和高危组前列腺癌中的四分位数间距（IQR）分别是50（42-61）、53（40-62）和80（45-91）（组间比较P值＜0.05），表明蛋白酶（CT-like）活性的升高与前列腺癌恶性程度呈相关，Caspase-like和Trypsin-like活性在非癌组、低危组和高危组前列腺癌患者血浆中的变化均无明显的统计学差异（P值均＞0.05）。2.用多因素分析显示血浆CT-like活性≥55者患高危前列腺癌的风险是CT-like活性＜55者的2.15倍（P=0.021）。高危前列腺癌患者的血浆样品中蛋白酶体酶蛋白Ub-prs，HSP70表达均下降，在高危前列腺癌患者的组织样本中蛋白酶体酶蛋白Ub-prs、HSP70、Bax、P27蛋白表达均明显下降。结论血浆CT-like活性与前列腺癌的恶性程度相关，根据血浆中CT-like活性变化可能对预测前列腺癌患者的预后有一定的临床应用价值。关键词：蛋白酶（CT-like），蛋白酶体的活性，前列腺癌，生物标志物3AbstractBackgroundandObjectivesTheUbiquitin-proteasomesystem(UPS)isthemajorintracellularproteindegradationsystem,whichmediatesdegradationofvariousintracellularproteinsandthereforeisinvolvedinregulatingimportantlifeprocessesofthecell.Themalfunctionofubiquitin—proteasomesystemtothetargetedproteinscouldenhancetheeffectofoneoproteins,reducetheamountofsuppressorproteins,inhibi