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遗传密码和蛋白质生物合成
真核和原核细胞参与翻译的蛋白质因子 阶段 原核 真核 功 能 IF1 IF2 eIF2 参与起始复合物的形成 IF3 eIF3、eIF4C 起始 CBP I 与mRNA帽子结合 eIF4A B F 参与寻找第一个AUG eIF5 协助eIF2 、 eIF3、eIF4C的释放 eIF6 协助60S亚基从无活性的核糖体上解离 EF-Tu eEF1? 协助氨酰-tRNA进入核糖体 延长 EF-Ts eEF1 ?? 帮助EF-Tu 、 eEF1?周转 EF-G eEF2 移位因子 RF-1 终止 eRF 释放完整的肽链 RF-2 第96页/共109页 五、蛋白质的运输及翻译后修饰 第97页/共109页 真核生物多肽链的合成(自学) 1、真核细胞核糖体比原核细胞核糖体更大更复杂; 2、起始氨基酸为Met,不是fMet; 3、肽链合成的起始:由40S核糖体亚基首 先识别mRNA的5’端-帽子,然后沿mRNA移动寻找AUG; 4、起始因子有12种,但只有2种延长因子和1种终止因子; 5、真核细胞中线粒体、叶绿体的核糖体大小、组成及蛋白质合成过程都类似于原核细胞。 第98页/共109页 肽链折叠是指从多肽链的氨基酸序列形成具有正确三维空间结构的蛋白质的过程。 体内多肽链的折叠目前认为至少有两类蛋白质参与,称为助折叠蛋白: (1)酶:蛋白质二硫键异构酶(PDI); (2)分子伴侣 肽 链 的 折 叠 Lasky于1978年首先提出分子伴侣(mulecular chaperone)的概念,这是一类在细胞内能帮助新生肽链正确折叠与装配组装成为成熟蛋白质,但其本身并不构成被介导的蛋白质组成部分的一类蛋白因子,在原核生物和真核生物中广泛存在。 第99页/共109页 1、肽链末端的修饰: N-端fMet或Met的切除 2、信号序列的切除 3、二硫键的形成 4、部分肽段的切除 5、个别氨基酸的修饰 6、糖基侧链的添加 7、辅基的加入 蛋白质的加工修饰 实例:胰岛素原的加工 第100页/共109页 胰岛素原的加工 A链区 B链区 间插序列(C肽区) HS SH SH SH HS HS 信号肽 N C 核糖体上合成出无规则卷曲的前胰岛素原 切除C肽后,形成成熟的胰岛素分子 切除信号肽后折叠成稳定构象的胰岛素原 S S S S N N C C A链 B链 胰岛素 C N S-S S S 胰岛素原 S S 第101页/共109页 多核糖体 第一个编码区 第一个编码区 第二个编码区 第二个编码区 终止\起始 终止 起始 mRNA mRNA 5′ 5′ 3′ 3′ 第102页/共109页 蛋白质定位 1、分泌蛋白 ● 信号肽假说简图 ● 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 2、线粒体与叶绿体蛋白 ● 蛋白质向线粒体的定位机制 第103页/共109页 信号肽假说简图 3ˊ 5ˊ SRP循环 mRNA 内质网膜 内质网腔 信号肽酶 信号肽 第104页/共109页 一些真核细胞多肽链上N-端的信号肽的结构 第105页/共109页 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 内质网 高尔基体 泡 泡 泡融入质膜 核糖体 芽泡 第106页/共109页 第107页/共109页 第108页/共109页 第109页/共109页 ② fMet – tRNAiMet进入 第64页/共109页 第65页/共109页 ③50S大亚基的结合 第66页/共109页 A:aminoacyl site P:peptide site E:exit site(大部分在大亚基上) 第67页/共109页 第68页/共109页 第69页/共109页 7、蛋白合成的延伸(elongation) 延伸因子EF-Tu EF-Ts 真核:EF-1 第70页/共109页 第71页/共109页 ①进位 第72页/共109页 ②转肽:肽酰转移酶(核糖体参与催化)
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