实验3薄层板制备及活化.pptVIP

* 3、以后的实验里会用到。 * 取锦纶丝（无色干净废丝即可）用乙醇加热浸泡2~3次，除去腊质等。称取洗净的锦纶丝1克，加85%甲酸ml，在水浴上加热使溶，再加70%乙醇6ml。继续加热使完全溶解成透明胶状溶液。将此溶液适量倒在水平放置的，用清洁液洗净的玻璃片上，并自然向周围推匀，厚度约0.3mm，薄层太厚时，干后会裂开。将铺好的薄层水平放在盛温水的盘上，使盘中的水蒸汽能熏湿薄层，盘子加玻璃板盖严密，薄板放置约1小时完全固化变不透明白色，再放数小时后，泡在流水中洗去甲酸，先在空气中晾干，后在烘箱中0℃恒温加热活化15分钟，冷后置干燥器中贮存备用。 * 硅胶（H）羧甲基纤维钠（CMC-Na）薄层 先将称好的CMC加入所需水量的8/10,让其充分溶涨后,在加热煮沸,然后将剩余水慢慢加入.这样在煮沸过程中不易形成颗粒,煮沸时间短. CMC溶液的浓度0.3-0.7%比较合适，实际操作中0.4％～0.5％最为实用，浓度高了将来显色时如果有加热过程稍不小心板子容易发黑，浓度低了铺出来的板子不结实，轻轻一碰就掉渣，不好保存，而且点样时会很紧张，容易出洞.  * 6块玻璃板 2.5×7.5cm，需要3g硅胶H，0.8%CMC-Na 10ml * 混合时，　如有需要可以适量的加入一定量的无水乙醇或丙酮来消泡， 取羧甲基纤维素（CMC-Na） 0.2g，溶于25ml水中，在水浴上加热搅拌使完全溶解，倒入烧杯中，加薄层层析用硅胶（颗粒度10~40μm的约6~8g） ————————够2.5×7.5cm玻璃板 10块。 制板方法很多，可自行创作。如，1、玻棒涂布（类似刮膜）；2、玻片涂布（两边放稍厚的玻板，倒硅胶，用另一个玻片边缘将硅胶浆刮至另一端。。。）３、倾斜涂布；４、机器涂布。。。 需注意： CMC-Na溶液煮了以后不能再用冷水兑，否则，几天以后就会变绿，起霉。注意放置时间太长的CMC-Na溶液可能会发黄，而且可能有霉菌出现，绝对不能再使用。 * * * 其Rf值分别为二甲黄0.58，苏丹红0.39，靛酚蓝0.08．可定其活度在II—III级 * １、板子会裂口，一则可能是因为硅胶的比例太大，二则可能是，板子要在常温下晾干后，再在烘箱中活化。如果铺完不久就在较高温度下，裂口的几率就比较高的。 ２、吸附剂的吸附性能强弱可用活度来表示，活度与其含水量密切相关，含水量增加，活度级别增加，吸附性能减弱。 吸附剂的活度选择 被分离物质的极性大，吸附剂活度要小，以免吸附太牢，不易洗脱；被分离物质的极性小，则吸附剂的活度要大，以免不被吸附，而无法分离。可改变板活化温度和时间来控制吸附剂的活度。 天然产物化学 天然产物化学 天然产物化学 * 实验 三 薄层板的制备及活化 ——硅胶板 第1页/共28页 * 薄层色谱简介 薄层色谱中的吸附剂是铺在玻璃、塑料或金属片或薄板上的较薄的、均匀的一层细粉状物质，因支持剂的种类、制备方法和选用溶剂的不同，可按吸附、分配或二者结合的方式达到分离化合物的目的。 TLC中涂布的物质如硅胶、氧化铝、聚酰胺等。硅胶是最常用的薄层色谱吸附剂。 第2页/共28页 * 可以通过比较斑点的Rf值，或将未知样品与对照品在同一板上展开至同样高度，对样品进行初步的鉴定。 还可通过比较可见斑点的大小进行半定量的判断。 还可以通过光密度测量法实现定量测定。 第3页/共28页 * 一、目的要求 1．掌握薄层板的制备及薄层层析的操作方法； 2．掌握吸附剂活度测定的原理及方法； 3．会应用薄层层析法检测识中草药化学成分。 第4页/共28页 * 二、薄层板的制备 1．不加粘合剂的薄层涂布法 （1）氧化铝薄层 （2）纤维素薄层 （3）聚酰胺薄层 2．加粘合剂薄层的涂布法 （1）硅胶G薄层 （2）硅胶（H）羧甲基纤维钠（CMC-Na）薄层 第5页/共28页 * （1）氧化铝薄层 将吸附剂置于薄层涂布器中，调节涂布器的高度，向前推动，即得均匀薄层。 本实验主要用下述简易操作涂布薄层，取表面光滑，直径统一的玻璃一支，依据所制备薄层的宽度、厚度要求，在玻璃棒两端套上厚度为0.3~1mm的塑料圈或金属环，并在玻璃棒一端一定距离处套上较厚的塑料圈或金属环，以使玻璃棒向前推动时能保持平行方向，操作时，将氧化铝粉均均地铺在玻璃板上，匀速向前推动。 第6页/共28页 * （2）纤维素薄层 一般取纤维素粉1份加水约5份，在烧杯中混合均匀后，倒在玻璃板上，轻轻振动，使涂布均匀，水平放置，待水分蒸发至近干，于100±2℃干燥30~60分钟即得。 第7页/共28页 * （3）聚酰胺薄层 取锦纶丝经一系列加工使其完全溶解成透明胶状溶液。 将此溶液适量倒在水平放置的洗净的玻璃片上，并自然向周围推匀，厚度约0.3mm,薄层太厚时，干后会裂开。 完全