抑制p38mk2信号通路对术后肠梗阻预防效果的研究-study on the preventive effect of inhibiting p38mk2 signal pathway on postoperative intestinal obstruction.docxVIP

抑制P38/MK2信号通路对术后肠梗阻预防效果的研究中文摘要目的:术后肠梗阻是一种常见的医源性综合征，是由腹腔手术中对小肠的机械性操作引起的。无菌性炎症反应促进了术后肠梗阻的发生和发展，导致小肠动力受损。丝裂原活化蛋白激酶的激酶2（MK2）在炎症反应中具有重要作用，并且是一确定的炎症相关疾病的药物靶点。在本研究中，我们将研究MK2与术后肠梗阻的联系，并进一步探讨MK2抑制剂是否能有效预防和减轻术后肠梗阻。方法:建立术后肠梗阻小鼠模型，实验组以对小肠的机械操作模拟手术中的操作，诱发术后肠梗阻；以不实施小肠操作的小鼠为对照组。第三组手术前1小时腹腔注射MK2抑制剂，之后进行手术操作。在手术后相应的时间段收集小肠组织标本进行相关检测。蛋白质免疫印迹技术检测MK2蛋白的表达。逆转录PCR结合实时定量荧光PCR检测前炎性基因的表达。整体的组织化学和免疫荧光染色检测小肠肌层中炎性细胞的浸润。石蜡切片的苏木素伊红染色检测小肠的形态学改变。体外肌电图和伊文思蓝灌胃体内肠运转检测小肠的蠕动功能。结果:对小肠机械操作引发的术后肠梗阻会导致MK2的激活。术前使用MK2抑制剂有效的降低了术后肠梗阻相关的前炎性基因的表达，如巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)，肿瘤坏死因子α(TNFα)，白介素6(IL-6)，白介素1β(IL-1β)，细胞间粘附分子1(ICAM-1)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)。术前使用MK2抑制剂有效的减少了术后肠梗阻小肠肌层中相关炎性细胞的浸润，如中性粒细胞，肥大细胞和单核细胞来源的巨噬细胞。并且术前使用MK2抑制剂有效地抑制了术后肠梗阻小肠肌肉收缩力的减弱和肠运转能力的减弱。.结论:在小鼠的术后肠梗阻模型中，MK2参与调节了小肠肌肉的细胞炎症反应。抑制MK2的活性有效的抑制了前炎性基因的表达，炎性细胞的浸润和肠蠕动功能的减弱，这些都表明MK2是预防和减轻术后肠梗阻的潜在有效的药物靶点。关键词：术后肠梗阻，炎性机制，MK2抑制剂ThestudyofP38/MK2inhibitorinpreventingPostoperativeIleusAbstractObjective:Postoperativeileus(POI)isacommoniatrogeniccomplicationcausedbyphysicaldisturbancestothebowelduringabdominalsurgery.AsepticinflammationcontributestothedevelopmentofPOIandleadstoimpairedintestinalmotility.Mitogen-activatedproteinkinase-activatedproteinkinase2(MK2)playsanessentialroleininflammationandisanestablisheddrugtargetformanyinflammatorydiseases.Inthisstudy，weevaluatedtheroleofMK2inPOIandinvestigatedwhetherinhibitionofMK2alleviatedPOI.MaterialsandMethods:Micewereshamoperatedascontrols;POIwasinducedbyintestinalmanipulation;MK2inhibitorwasadministered1hrbeforeintestinalmanipulation.Boweltissueswerecollectedandanalyzedbythefollowingtests:WesternBlottingtotesttheexpressionofMK2;real-timereverse-transcriptasepolymerasechainreactiontotesttheexpressionoftheproinflammatorygene;whole-mounthistochemistryandimmunofluorescencetotesttheinfiltratingcellsinmuscularis;mechanicalactivityrecordingandintestinaltransitmeasurementtotesttheintestinalfunction.Results:BowelmanipulationresultedinanupregulationofMK2activation.PreoperativelytreatmentofMK2inhibitorreducedtheproinflammatorygeneexpressioni