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Eu(Ⅲ)作为电化学探针的性质研讨
中文摘要
中文摘要
中心蛋白是一种约19.5KDa的酸性钙结合蛋白,属于钙调蛋白的大家族,广泛
存在于真核生物中。中心蛋白含有四个EF—hand结构域,每个结构域可结合一个钙离
子。到目前为止,关于中心蛋白的研究主要集中在其生物功能和结构上.
然而,由于具有重要生理功能的钙离子既无颜色又无磁性,难以得到蛋白与钙离
子配位环境的结构信息。而稀土镧系离子具有丰富的光、电、磁性质,当其配位环境
发生改变时,引起光、电和磁信号的改变,从而可以通过实验手段探测它们在生物体
内的行为。同时,稀土离子与钙离子具有非常相似的化学性质及配位行为,因此稀土
离子能够很容易地取代生物大分子中无探测信号的钙离子,研究钙离子的配位微环
境、成键情况。
本文选择具有良好电化学活性的Eu”作为探针,对Eu”与中心蛋白的相互作用
作了一些基础性的研究工作。
首先较为详细的讨论了Eu3+的电化学性质。当底液为0.2moFL
pH6.0的
X
HAc-NaAc缓冲溶液、eu3+浓度为l10。4moFL时,在棵热解石墨电极与裸玻碳电极
上均有一对氧化还原峰,且受扩散电流控制;当底液为0.01
moFLpH7.4Hepes缓
X104
冲溶液、Eu3+浓度为1 moFL时,在裸热解石墨电极上出现一对可逆性非常好
的氧化还原峰,同样受扩散电流控制。此外,实验结果还表明:不同电极、不同浓度、
不同底液以及底液的酸度等因素对E一+的电化学性质有显著的影响。
7.2,0.1moFL
准可逆的氧化还原峰;在pH
结合形成1/1的配合物。
第三,讨论了Eu”与氨基酸的相互作用以及Eu斗与人血清蛋白、牛血清蛋白的
相互作用的电化学性质,为研究Eu3+与中心蛋白的相互作用奠定了一定的实验基础。
最后,将稀土Eu3+替换中心蛋白的钙离子,分别与中心蛋白的含钙结合位点的不
钙结合位点中心蛋白发生相互作用,氧化还原峰电位发生移动同时伴随有不同程度的
峰电流减小。
EuOlll作为电化学探针的性质研究
此外,本文还对多种化合物与DNA的相互作用进行了电化学测定,依据其循环
伏安曲线的特征判断化合物与DNA相互作用的方式,结果表明电化学方法测得的实
验结论与紫外光谱、荧光光谱实验结论一致。
关键词:时+;循环伏安;中心蛋白
Ⅱ
ABSnL^C.r
ABSTRACT
all of1 isa
Centrinis acidic 9.5KDa,which
calcium-bindingprotein
memberofCaM inbiological
proteinsuperfamilyexisting谢dely
containsfour sitesof
centrosomes.Centrin
potentialcalcium-binding
to oncentrinhasfocused
EF.hand the mainly
structure.uppresent,research
onits
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