磁性壳聚糖微球牢固辣根过氧化物酶的研究.pdfVIP

中文摘要 摘 要 采用反相悬浮聚合法，制备了磁性壳聚糖微球(磁性CS-M)，并将其作 载体固定化生物活性物质一辣根过氧化物酶(HRP)。探讨了固定化酶的理化 性质以及处理含酚废水的呵行性。 第一部分：首先综述丁磁性高分子微球的制备、性质及其在生物医学、 细胞学、生物工程等领域中的应用；其次，介绍了酶的固定化新方法及载体 的改进；最后，阐述了甲壳素／壳聚糖在固定化酶中的应用。通过这一部分 的概述，说明了在固定化酶体系中，利用磁性壳聚糖微球作载体，有其独特 的优势及重要的意义。 1一12 第二部分：以聚乙二醇作分散剂和稳定剂，水为分散介质，在I)¨l 条件下，用化学共沉淀法制备了磁流体。然后刚壳聚糖作为包裹材料包埋自 制的磁流体，得到磁性cs—M。分析结果表明：该磁流体的粒度较均匀、且 具有较好的稳定性及分散性；利用反相悬浮聚合法合成的磁性cs—M具有核 壳结构，粒径在50urn左右，且该微球具有较强的磁响应性，在一定的外加 磁场作用下可快速沉降。 第三部分：以磁性cs—M作载体对HRP进行固定化研究，同时，作为比 较，还用壳聚糖微球(CS-?d)来固定ItRP。结果表明：①固定化酶的活力受 载体的性能、交联剂的用量、载体与酶的比例以及环境的温度、pH值等因 素的影响；②CS-M固定化酶和原酶液的最适p}1均为6．5，而磁性CS—M固 定化酶的最适pIf为7．0和9．0；原酶的最适温度为5()℃，磁性cs—M固定化 酶和cs—M固定化酶的为60。C；磁性cS—M固定化酶和cs—M固定化酶及原酶 {，艾摘要 4mg／mt、2．34×10-4mg／ml和8．0× 液的米氏常数(k0分别为1。05×10 10mg／ml；不同的金属离子对原酶活力有不同的影响，而对磁性CS—M固定 化酶和CS—M同定化酶活力的影响较小：③磁性CS—M同定化酶的操作稳定 性和贮存稳定性均优于CS-M围定化酶。 第四部分：初步探讨了过氧化物酶的作用机理及不同反应条件下磁性 CS-M同定化IIR!，催化氧化含酚废水的效果。结果表明：①过氧化物酶是催 化Il舢‘j氢供体之间的氧化反应；②俎然酶的形态不同，但它们的反应条件 基本相同：酶催化氧化酚的反应在l小时基本达到r平衡；在该反应体系中， 当酶活力为40u时，酶对酚的去除率最高；当I{。0。与酚的物质的蠡的比约为 l时，酶的作}{】效果最佳；不同形态的酶均较适宜催化氧化低浓度酚废水： ③磁性cs—M固定化IIRP的反应活性比原酶和CS-M固定化IIRP的岛，且在混 合酚废水处理中，不同酚废水之间存在一定的协刷效应。 综上所述，磁性CS-M固定化HRP的理化性质及去酚能力均优于原酶和 Cs—M固定化HRP，且可利用其磁性响应性简便地回收磁性ItRP，显示了其在 生物化学及含酚废水处理方面的潜在的应用价值。 Peroxidaseon ofHorseradish Immobilization Chitosan Magnetic Microspheres ofthe wasto Abstract：The Magnetic study prepare purpose present as Chitosan thatwereusedacarriertOimmobilizeHorseradish Microspheres magneticparticles(Fes04hydrate)wereprepared Peroxidase(HRP)Firstly,the