流动-酶催化化学发光新体系的研讨与应用.pdfVIP

摘要 本文综述部分简要介绍了化学发光分析的基本情况、发展以及应用。流动化 学发光分析法具有仪器设备简单、分析速度快、灵敏度高、线性范围宽等优点， 所以越来越受到分析化学工作者的重视。本文基于鲁米诺一过氧化氢体系的化学 发光现象，以辣根过氧化物酶(HRP)和血红蛋白(}fb)作力酶催化剂，采用 固定化酶和可更新表面联用流动注射等技术，建立了测定抗坏血酸、胆固醇及免 疫球蛋自G的流动注射化学发光分析法．研究报告包括以下三部分： 固定化酶技术，建立了一种简单、快速检测抗坏血酸的流动注射化学发光分析新 2．利用血红蛋白㈣作为模拟酶催化HzOz与鲁米诺的化学发光反应，将该 反应与胆固醇氧化酶(COD)催化氧化胆固酵生成1-12Ch的反应偶合，联用流动注 射分柝技术，建立了测定胆周醇豹流动注射化学发光分析法。该方法用于测定人 体血清中的游离胆固醇及总胆固醇翕量，结果令人满意。进样频率为30个／小时， mol·¨‘． ． 1．5xlo．7 4BFast 3．将苇抗人kG抗体(第一抗体)固定予包被有蛋白A的Scpharose Flow凝胶微珠表面制成固相抗体，用辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人IgG抗 体作为第二抗体，在自制的微型流通式反应器中与人kG进行免疫反应生成双抗 体夹心式抗原谎体复合物。该复合物中含有的HRP能够催化发光底物增强化学 发光，其发光强度与人体血清中IgO的含量成良好的线性关系。由于包被有蛋白 4FF凝胶微珠颗粒非常小(45-165pm)。每次测定所需的第一抗体 A的Sepharose 4FF凝胶微珠进入微型流通式反应器书，完成一次 随包被有蛋自A的Sepharosc 测定后徽珠即随废液一起排出。从而用自制的微型流通式反应器建立了流动注射 可更新表面非均相增强化学发光免疫法测定人体血清中的免疫球蛋白G的新方 法。体系经优化后，检出限为0．01mg／L。分析速率达到10次甩，校正曲线的线 性范围为0．05～3．Omg／L。本法已成功地应用于人血清中IgG的测定。 关键词：辣根过氧化物酶(}珏理)；血红蛋白(Hb)；流动注射化学发光；固定 化酶：流通式反应器：可更新表厩技术 H Abs仃acl ABSTRACT the ofthis h review basic thesis，the andthe principles，characteristics ofchemiluminescenceare introduced．Theflow applications briefly injection(FI-CL) and is more more toits becoming popular owing simple sensitivity,widedynamic and flow range．reproducibility,simplicityrapidity．New chemiluminescence methods with suchaS other injection coupled