马鞭草化学成分及红花指纹图谱的研讨.pdf

擅 要 摘 要 本文分两部分内容，一部分是重要民间草药马鞭草科植物马鞭草的化学成分研究， 另一部分是重要的中药材红花的指纹图谱研究。 马鞭草中的马鞭草苷(又称山茱萸苷)、戟叶马鞭草瞢和毛蕊花苷是重要的免疫 调节化合物，其中马鞭草苷是我国重要传统中成药六昧地黄丸中山茱萸的重要活性成 分，但在山茱萸中的含量低，而在马鞭草中有较高含量。本文在研究马鞭草化学成分 的基础上对上述三个主要活性成分的含量测定、提取分离条件和结构改造等方面进行 了研究。发现了马鞭草苷的自动氧化现象，研究了影响自动氧化的因素，并对其机理 进行了分析。在此基础上研究了不同产地马鞭草的HPLC指纹图谱，并扩展研究了菊 科植物红花的指纹图谱，建立了红花中药材、红花黄色素和红花黄色索氯化钠注射液 的HPLC指纹图谱。 ～、对马鞭草的化学成分进行了研究，共从马鞭草全草的乙醇提取物中分离出七 个化合物，通过理化方法和光谱分析确证它们分别是7《x,2213．二羟基谷甾醇、熊果酸、 3值，24-二羟基齐墩果酸、胡萝}苷、马鞭草苷、戟叶马鞭草苷和毛蕊花苷。LC．MS联 用法初步确定了马鞭草苷母液中的化合物为3,4．二氢马鞭草苷。 二、研究并建立了戟叶马鞭草苷和马鞭草苷(流动相为水．乙腈(90：10)．流速为1 mL／min)的HPLC mL／min)、毛蕊花苷(流动相：水．乙腈．乙酸(80：10：10)，流速为l 含量分析方法及马鞭草提取液的SPE(固相萃取)处理方法，方法学(系统适用性) 研究表明所建立的方法准确、快速、灵敏。 通过研究确定了上述三种化合物的提取条件为：80％乙醇与干燥马鞭草以75：10 h，连续提取3次；并证明了该提取条件可 (体积(mL)：重量(曲)的比例在65C提取12 应用于中试设备。完善了大量提取制各戟叶马鞭草苷、马鞭草苷和毛蕊花苷三种化合 物的方法，并对它们进行了大量的制备，为三者衍生物的合成及构效关系研究打下了 坚实的基础。 三、发现并确定了马鞭草提取液中马鞭草苷的自动氧化现象，初步研究表明毛蕊 花昔对自动氧化有较大影响，进～步研究表明温度和毛蕊花苷的浓度对马鞭草苷的自 动氧化均有影响。初步分析了自动氧化现象的机理。这对马鞭草苷的提取、制各和保 郑州犬aJ：llt士掌位论文 存有重要的参考价值。 四、比较并证明了不同来源马鞭草中马鞭草苷、戟叶马鞭草苷和毛蕊花苷的含量 存在很大差异，它们提取液的HPLC指纹图谱既有差别又有相关性。 建立了红花中药材的HPLC指纹图谱分析方法(流动相为水一甲醇一乙腈．浓磷酸 ml_／min)。正交试验法研究并确定了红花黄色素的最 (75：25：0．7：0．285，v／v)，流速为0．85 min。 佳提取条件为：40目的药材与水按1：100的重量比混合在65．75C提取20 通过一系列试验建立了包括供试品制备和HPLC分析方法在内的制备红花中药材、 红花黄色素和红花黄色素氯化钠注射液指纹图谱分析的标准方法，通过对各自lO批样 品的分析建立了各自的HPLC指纹图谱及相应的指纹图谱参数：l、红花中药材：①共 (0．659)，S(1．ooo)，5”(1．331)，6”(1．554)，7”(2．375)，8”(2．731)· 应用红花中药材的HPLC指纹图谱对不同产地的红花进行了对比，表明存在指纹 图谱的变异现象。对比并分析了上述三套指纹图谱的相关性，提出了对制订中药材指 纹图谱的看法。 五、对：马鞭草苷、戟叶马鞭草苷和毛蕊花苷进行了结构改造，确定了其中13个化 合物的结构，其中9个为新化合物。对毛蕊花苷的部分衍生物做了体外免疫活性试验， 其它化合物的活性测定正在进行中。发现了碱性条件下乙酰化时底物发生了甲氧基的 转位现象，并分析了其机理。 担 要 利用温和条件下二丁基氧化锡催化对全乙酰化毛蕊花苷选择性地部分或全部脱除 了乙酰基。