玉郎伞黄酮对aβ42阿尔茨海默病细胞模型和果蝇模型的保护作用分析-protective effect of yulangsan flavones on a β 42 alzheimer disease cell model and drosophila model.docxVIP

玉郎伞黄酮对Aβ42阿尔茨海默病细胞模型和果蝇模型的保护作用研究中文摘要目的：探讨玉郎伞黄酮(YLSF)对阿尔茨海默病(AD)细胞和果蝇模型的保护作用及机制，为其临床开发与应用提供基础理论和科学依据。方法:1.应用生物化学的方法研究YLSF对SH-SY5Y细胞中caspase-3活性的影响。2.应用GAL4/UAS系统构建在神经系统过表达Aβ42的转基因果蝇模型。3.通过表型观察，研究YLSF对Aβ42转基因果蝇模型爬行能力及寿命的影响。4.应用生物化学的方法研究YLSF对Aβ42转基因果蝇脑组织SOD活性及MDA含量的影响。5.应用反向高效液相色谱技术检测YLSF对Aβ42转基因果蝇脑组织ATP水平的影响。结果：1.Caspase-3结果显示：与空白对照组比较，Aβ42(10μM)干预组SH-SY5Y细胞中caspase-3活性明显增高。与Aβ42干预组比较，YLSF(0.01mg/ml)与Aβ42(10μM)联合干预组SH-SY5Y细胞caspase-3活性显著下降。与空白对照组比较，YLSF(0.01mg/ml)干预组SH-SY5Y细胞caspase-3活性无显著性差别。2.成功应用GAL4/UAS系统构建果蝇神经系统过表达Aβ42的转基因果蝇模型。结果发现，25天成蝇脑组织切片发现神经细胞区域有神经元细胞死亡留下的空洞，而同龄正常对照果蝇则未出现明显的空洞，并通过行为学观察发现其爬行能力降低及寿命缩短。3.采用适宜剂量YLSF(0.067mg/ml)干预Aβ42转基因果蝇模型后，其爬行能力得到明显的改善。4.采用适宜剂量YLSF(0.067mg/ml)能延长Aβ42转基因果蝇及正常果蝇的寿命。5.分光光度计检测结果显示：与正常果蝇比较，Aβ42转基因果蝇SOD活性降低，MDA含量增高；而YLSF干预组，两个指标均未表现出明显的变化。与Aβ42转基因果蝇比较，YLSF干预后的Aβ42转基因果蝇SOD活性增加，MDA含量降低。6.反向高效液相色谱动态检测果蝇脑组织ATP含量发现：早期各组Aβ42转基因果蝇脑组织ATP水平无明显差异。而中晚期脑组织ATP逐渐显示差异性，其中30、36天成蝇，Aβ42转基因果蝇较正常对照果蝇ATP含量降低，而YLSF干预组较未干预Aβ42转基因果蝇ATP含量明显增高。结论:1.体外细胞实验表明，YLSF能够有效抑制Aβ42诱发的SH-SY5Y细胞凋亡。2.成功构建果蝇神经系统过表达Aβ42转基因果蝇模型的研究表明，其病理特征及表型与AD存在相关性。3.YLSF干预Aβ42转基因果蝇，其爬行能力得到明显的改善。4.适宜剂量的YLSF能有效延长Aβ42转基因果蝇及正常果蝇的寿命。5.SOD活性、MDA检测结果表明：适宜剂量的YLSF能够增强Aβ42转基因果蝇清除自由基的能力及抗脂质过氧化的能力。6.YLSF能够改善线粒体的功能，增加Aβ42转基因果蝇脑组织线粒体ATP的生成。关键词：阿尔茨海默病；玉郎伞黄酮；Aβ42转基因果蝇；细胞凋亡；氧化应激；ATPStudyofProtectiveEffectofYulangsanFlavoneonAβ42-inducedcellModelandDrosophilaModelAssociatedwithAlzheimersDisease(AD)ABSTRACTObjective:ToinvestigatethepreventiveeffectsofYulangsanFavone(YLSF)toAlzheimer＇sdisease(AD)oncellanddrosophilamodelsrelatedtoAlzheimer＇sdisease(AD)andtheunderlyingmechanism,thisstudyaimstoprovidethebasicandscientifictheoriesforYLSFclinicalapplication.Methods:BiochemicaltechniqewasutilizedtostudytheeffectofYLSFontheactivationofcaspase-3inSH-SY5Ycells.Aβ42transgenicdrosophilamodelwasestablishedbyGAL4/UASsystem.TheeffectofYLSFontheclimbingabiltityandlifespanofAβ42transgenicdrosophilamodelswasinvestigated.BiochemicalmethodwasusedtostudytheeffectofYLSFonSODactivityandMDAcontentinAβ42transgenicdrosophilabrainti