京尼平交联磁性壳聚糖微球的制备及酶的固定化.pdf

摘要 京尼平(Genipin)是栀子苷经p一葡萄糖苷酶水解后的产物，是一种 天然生物交联剂。京尼平属于环烯醚萜类的化合物，具有羧基、羟基 等多个活性官能基团，可以以单分子和多分子形式与胶原、蛋白质、 明胶和壳聚糖等进行交联，得到稳定、有效的交联制品。相较于传统 的化学交联剂毒性大的缺点，京尼平作为交联剂，则具有生物相容性 好，抗降解能力强和细胞毒性低等的优点。 近年来，京尼平作为交联剂广泛的应用在生物医学等领域，然而 在固定化酶方面的应用相关报道较少。京尼平作为酶载体的交联剂有 着广阔的应用前景，所以交联条件的研究及固定化酶的研究也显得尤 为重要。 本文就磁性壳聚糖微球的制备及表征、京尼平交联磁性壳聚糖微 球的制备及表征和京尼平交联磁性壳聚糖微球对酶的固定化等方面 做了以下的研究： 1．将反相悬浮法与中和沉淀法结合，即由机械搅拌得到磁性壳聚糖 的油包水微球，随后快速将其倒入含高浓度氢氧化钠的凝结液中，即 可得到磁性壳聚糖微球。用红外光谱、电子显微镜表征其结构，考察 制备过程中各项影响因素。结果表明：用该法制备的微球大小可控， 磁性大小可控，并可实现工业化生产。 2．以制备的磁性壳聚糖微球为载体，京尼平为交联剂，脂肪酶为模 型酶进行固定化，得到了京尼平交联浓度、交联时间、交联温度及交 联pH的最优条件。用红外光谱、扫描电镜表征其结构，结果表明， 京尼平作为交联剂所得的交联磁性壳聚糖微球疏松多孔，适合于酶的 固定化。 3．以制备的京尼平交联磁性壳聚糖微球为载体，进行脂肪酶及乙酰 胆碱酯酶的固定化。研究了酶固定化时间，固定化温度及给酶量的最 佳条件，并研究了固定化酶的性质及酶抑制剂的亲和吸附。结果表明， 以制备的京尼平交联磁性壳聚糖微球为载体所得的固定化酶酶活性 高，有良好的热稳定性及pH稳定性，还具有易分离、可重复利用等 优点。 关键词：磁性壳聚糖微球，京尼平，固定化酶，脂肪酶，乙酰胆碱酯 酶 ABSTRACT an obtainedvia of was enzymatichydrolysis Genipin product extractedfromGardenia wasanatural geniposide jasminoides．It theclassofiridoid belonged compounds， crosslinkingagent．Genipin a ofreactivefunctionalsuchas havingplurality groups carboxylgroups， with and couldbecrosslinked hydroxylgroups．Genipin collagen，protein， manner．And andchitosanina moleculeormulti—molecules gelatin single itcouldobtainstableandeffectivecross—linked was products．Genipin materialdueto itsbetter consideredas anidealbiomedical to