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不同强度力竭运动大鼠运动后12 h肝细胞凋亡研究 　　摘 要: 研究对象、方法:利用细胞免疫组化的方法研究力竭运动后12 h成年雄性SD大鼠肝细胞凋亡 同肝细胞内的自由基水平和钙代谢之间的关系。结果:1)运动组与C组相比,凋亡细胞的数 量差异显著(p 　　关键词:肝细胞凋亡;氧化自由基;线粒体Ca??2+? 　　中图分类号:G804.2 　　文献标识码:A 　　文章编号 :1007-3612(2010)02-0059-05 　　 　　A Study on the Hepatic Cells Apoptosis in Rats after 12 Hours of 　　Cessation of ?Different Intensity Exhaustive Exercise 　　CHEN Wei?1,FAN Xin?sheng?1,ZHANG Ting?yan?1,LI Shan?ni?2 　　(1. Department of Sport Medicine, Taishan Medicine University, 　　Taian 271021, Shandong China; ?2.School of Biological Science and Technol ogy, Central China University, Changsha 410083, Hunan China) 　　Abstract:With the method of immunohistochemica, the paper attempts to ex plore the correlation among hepatic cell apoptosis, level of oxygen free radica ls and mitochondria calcium in ischemic/reperfusion hepatic cells of the male mo use. As a result, it is found that:1) in HE group and ME group, there are many 　　detec table apoptotic hepatic cells, which are significant compared with that in the c ontrol group. In addition, the difference of apoptotic cells between two exercis e groups is also significant(p 　　投稿日期:2009-10-15 　　作者简介:陈伟,讲师,硕士研究生,研究方向运动人体科学。 1 研究对象与方法 　　1.1 研究对象及运动方式 ??研究对象为成年雄性SD大鼠30 只,体重(215.2±16.8)g,月龄为8周龄,并随机将其分为对照组(C)、中等强度力竭运动 组(ME)、大强度力竭运动组(HE),每组10只;运动方式根据Berdford动物运动模型[1],采用电动跑台。运动组先进行适应性跑台练习然后按不同强度力竭运动进行实验,中等 强度力竭运动组初始速度为10 m/min,持续时间12 min,逐渐增加运动负荷,达到速度为19 .3 m/min(相当于76%V#8226;O2max)、持续到力竭。坡度为10°。大强 度力竭运动组初始速度为26.8 m/min(相当于92.3% V#8226;O2max),持 续到力竭。坡度为10°。 　　1.2 实验仪器与试剂 　　主要仪器:820轮转组织切片机、Nikon E600显微照相图像采集系统、722型光栅分光光 度计、PT动物跑台等。 　　主要试剂:原位末端标记细胞凋亡检测试剂盒、SOD,MDA,GSH,蛋白定量,Ca??2+ ?试剂盒(皆购于南京建成生物工程有限公司)等。 　　1.3 标本制备?1.3.1 血清制备 大鼠断头颈部取血3 mL,室温静置、离心10 mi n,取上清液即血清。 　　1.3.2 组织取样 对照组与运动组大鼠分别于安静状态和运动后1 2 h断头处死,取肝左侧 叶,投入3.7%的福尔马林缓冲固定液中固定4～8 h后进行常规石蜡包埋。取样本0.2 g,剪 碎后加入9%的冰生理盐水,用电动匀浆机在冰水浴中进行匀浆,匀浆液离心后提取上清液。 　　1.4 检测指标 　　TUNEL标记切片用Nikon E600显微照相图像采集系统进行照相以检测细胞凋亡数量、HE 染色观察肝细胞的整体结构、采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性、采用硫代巴比妥酸(TBA)法 测定MDA含量、采用二硫代二硝基苯