人脑胶质瘤中MMP-9、CD133蛋白表达及临床意义.docVIP

人脑胶质瘤中MMP-9、CD133蛋白表达及临床意义 　　【摘要】 目的 探讨人脑胶质瘤中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、肿瘤干细胞标志物CD133蛋白的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测66例不同级别胶质瘤组织标本及15例正常脑组织标本中MMP-9、CD133蛋白表达。结果 人脑胶质瘤标本中MMP-9、CD133蛋白表达明显升高；CD133及MMP-9蛋白总的阳性细胞表达率随着胶质瘤病理级别的增加而增高（P 　　【关键词】 胶质瘤； 基质金属蛋白酶-9； CD133蛋白； 肿瘤干细胞?? 　　Expression and clinical significance of MMP-9 and CD133 protein in human gliomas MA Qing-fang?*,YANG Mei,CHEN Jian,?et al?.?*Jining First People?s Hospital Affiliated to Shandong Provincial Academy of Medical Science,Jining 272000,China? 　　【Abstract】 Objective To study the expression and clinical significance of MMP-9 and CD133 protein in human gliomas.?Methods ?Sixty-six cases of gliomas and fifteen cases of normal brain tissues were tested by immunohistochemistry for MMP-9 and CD133 protein.Results The expression of CD133 and MMP-9 were significantly higher in human gliomas than that in normal brain tissues.It was shown that the MMP-9 and CD133 protein expression were closely correlated with the grade of gliomas.There was a positive reciprocity between the positive rates of CD133 and MMP-9 protein in human gliomas（P[1]。现已明确，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）可以降解、破坏细胞外基质，并且参与肿瘤血管生成，为肿瘤的侵袭性生长、复发及转移提供条件，其中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在人脑胶质瘤中尤为重要[2，3]。本实验采用免疫组织化学的方法，检测66例不同级别胶质瘤组织标本及15例正常脑组织标本中MMP-9、CD133蛋白的表达情况。探讨人脑胶质瘤中MMP-9、CD133蛋白的表达在肿瘤的侵袭性生长、复发及转移中的作用，以期为判断预后提供临床指导，并为胶质瘤的侵袭性生长、复发及转移机制的研究提供帮助。? 　　1 资料与方法? 　　1.1 一般资料 选取山东省济宁市第一人民医院神经外科2009年1月~2011年7月66例胶质瘤标本，术前均未接受放疗或化疗。标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋。按照WHO（2000年版）的分类及分级标准，其中Ⅰ级10例，Ⅱ级20例，Ⅲ级16例，Ⅳ级20例，包括星形胶质细胞瘤44例，节细胞胶质瘤1例???脉络丛乳头状瘤4例，少突胶质细胞瘤11例，室管膜瘤5例，髓母细胞瘤1例。男36例,女30例，年龄3~64岁，中位年龄42岁。正常脑组织为脑外伤行内减压术切除的脑组织，固定方法同上。? 　　1.2 主要试剂 CD133兔抗人多克隆抗体，MMP-9鼠抗人单克隆抗体，抗兔/鼠-HRP检测系统，底物缓冲液，DAB色原均购自上海长岛生物技术有限公司。阳性对照片也由该公司提供。? 　　1.3 免疫组化方法 均采用二步法TM。切片预处理：（1）石蜡切片（厚度3 μm），二甲苯脱蜡，酒精梯度水化。（2）在10 mM，pH 6.0的柠檬酸缓冲液中煮20 min，室温下冷却?20 min?，对组织进行相应的抗原修复。（3）切片用3% H?2O?2处理5 min。染色：①用PBS洗3次，每次2 min。②加一抗一滴，室温放置60 min。③用PBS洗3次，每次2 min。（4）加一滴检测试剂，室温放置30 min。（5）用PBS洗3次，每次?2 min?。（6）DAB显色10 min。（7）苏木素复染，脱水，封片。以PBS代替一抗作空白对照