初发和复发生殖器疱疹患者NKLAK细胞活性和T细胞亚群比较.docVIP

初发和复发生殖器疱疹患者NKLAK细胞活性和T细胞亚群比较 　　【摘要】 目的比较初发和复发生殖器疱疹患者NK、LAK细胞活性和T细胞亚群的变化,探讨免疫功能与生殖器疱疹初发及复发之间的关系。方法 对复发组、初发组的患者及正常对照组人群,检测NK和LAK细胞活性和T细胞亚群。结果 初发组和复发组的NK活性比正常组分别降低了28.2%和27.6%,经统计学处理有显著性或极显著性差异(P0.05)。与初发组与复发组之间的CD+4、CD+8及CD+4/CD+8有显著性差异(P 　　【关键词】 生殖器疱疹;初发;复发;免疫功能;T细胞亚群;NK细胞;LAK细胞 　　 　　作者单位:523721广东省东莞市塘厦医院(满洁 倪吉志 王雪宁 骆玲华 陈艳清 杨少强 谢国烈 陈伟俊);东莞市凤岗医院(王建勇) 　　 　　生殖器疱疹(genital herpes,GH) 是有Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2) 感染引起的一种疾病, 由于HSV-2 在人体内不产生永久性免疫力,是一种常见的难治愈的性传播疾病,随着性传播疾病发病率的上升而逐渐增多。该病复发率高,一年内的复发率约为60%,在女性可引起不孕、流产或新生儿死亡。而HSV-2与女性宫颈癌的发生密切相关,还能激活HIV复制,增加 HIV感染机率[1]。大量研究证实,该病原发感染与细胞免疫功能低下有关,如免疫缺陷的患者皆易并发单纯疱疹。因此,预防复发及控制该病的流行显得非常重要。通过测定在初发和复发生殖器疱疹患者外周血中NK细胞、LAK细胞活性和T细胞亚群的变化,来探讨免疫功能与生殖器疱疹初作及复发之间的关系。现报告如下。 　　1 资料和方法 　　1.1 临床资料 患者均来自广东省东莞市塘厦医院2006年5月至2008年12月门诊的病例,均经PCR检测确诊。患者中,男性生殖器疱疹主要见于包皮、冠状沟及龟头等,女性主要见于大小阴唇和阴道口,皮损为米粒大小,簇集性分布。复发组65例,男38例,女27例,年龄20~56岁,平均31.4岁;病程20～61个月,平均42.3个月,每年发作2～6次。初发组63例,男36例,女27例,年龄19~55岁,平均30.7岁。所有患者治疗前2年内未系统使用免疫调节剂及糖皮质激素,且排除妊娠及哺乳期妇女、患有免疫性疾病及系统性疾病、肝肾功能及血尿常规不正常者。正常对照组46例,健康体检者,男25例,女21例,年龄19~56岁,平均33.1岁。3组在年龄、性别、文化程度??方面差异均无统计学意义(P0.05)。 　　1.2 方法 　　1.2.1 NK和LAK细胞活性的测定[2]按常规用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,用RPMI1640培养液洗涤3次,调整细胞密度为5×10-9?/L,加入IL-2(终浓度为500 ml/L)培养72 h,即可诱生出LAK细胞。以K562细胞(本室保存)作为靶细胞,采用LDH释放法测定NK和LAK细胞的杀伤活性。 　　1.2.2 T细胞亚群检测 由美国BD公司提供的FACSCalibur型号的流式细胞仪测定,所用鼠抗人CD-FITC、CD4-PerCP、CD-PE及对照管PE/IgG1-FITC/IgG单克隆抗体均购自美国BD公司。由化验室专人检测,每份标本均做各项测定管和阴性对照管。操作步骤如下:①EDTA抗凝血2 ml;② 准备4支试管,每管各加入相应单克隆抗体10 μl,全血100 μl混匀,避光15 min;③加溶血素2 ml避光10 min。④300 g/r离心10 min,倾去上清液,加2 ml PBS洗1次。⑤每管加l%多聚甲醛0.5 ml。上流式细胞仪检测,收集10000个以上细胞。用计算机分析测定结果。 　　1.2.3 统计学方法 所得数据以(x±s)表示,采用SPSS 11.0软件进行方差分析。 　　2 结果 　　2.1 3组NK和LAK细胞活性的变化 结果见表1。初发组和复发组的NK活性比正常组分别降低了28.2%和27.6%,经统计学处理差异有统计学意义(P0.05)。与初发组与复发组之间的CD+4、CD+8及CD+4/CD+8比较差异有统计学意义(P90%)。人体感染HSV-2后,病毒可长期潜伏于骶神经节中,当宿主受外伤、细菌感染、月经来潮、精神创伤、劳累及免疫受抑制等情况下,病毒可以复苏和再激活,由神经节返回经常受累部位的皮肤黏膜而出现感染复发[3],而免疫抑制或免疫缺陷可导致HSV再活动频繁[4]。由于HSV-2在人体内不产生永久性免疫,同时又可逃避宿主的防御机制,所以,由于原发感染后,当有焦虑、紧张、劳累、性生活过度、月经期、酗酒等诱因时或内分泌紊乱、应激状态等情况下,病毒被激活复制而引起该病反复发作,平均年复发5～8次。近年来,此病的发病率迅速增加,WHO估计全球每年新发生殖器疱疹病例为