尖吻蝮蛇毒纤溶组分的纯化、性子及其光谱学研究.pdfVIP

±堕!!兰垫查盔堂塑主堂些堕苎 一—————————!!墨 摘 要 在蝰亚科、蝮亚科和眼睛科等蛇毒中存在着一类能直接溶解纤维蛋白(原) 的酶，称为纤维蛋白(原)溶解酶(简称纤溶酶)。从}临床角度看，这些纤溶酶可用 于溶解在心肌梗塞、中风、血栓等期间形成的血凝块。作为一种潜在的强有力 的抗栓药物，纤溶酶已成为蛇毒蛋白酶领域的一个研究热点。本文在第一和第 二章首先综述国内外蛇毒中影响血液系统的堡麦组盆尤其是红擅萱的研究进 展。在论文的第三至第六章中，系统地总结了叁堕蝗磐蛇毒中纤溶酶的纯化、 性质和功能及其光谱特性。通过新的分离纯化方法，首次从皖南尖吻蝮蛇毒中 1I。另外，作者1999年曾在国家地质 分离纯化得到一新的电泳纯纤溶组分FP 实验测试中心进行了一段时间的Re．Os同位素体系方面的研究，因篇幅所限， 、 仅将有关利用ICP—MS研究OsO。的溶剂萃取行为的内容写出，作为论文的第七 毒。 厂 {论文的主要研究成果如下： FP I和FP 1 分子量为29675．5，SDS．PAGE测得FP II的分子量约为30kD)，两者都具有两条 不同的肽链，两条多肽链间由二硫键相连。两者都是酸性蛋白，但FPII的等电 点较FP I更高，并且两者的摩尔消光系数相差较大，FPI的摩尔消光系数是FP II的1．9倍，表明FPI含有比FPlI更多的Trp和Tyr残基。 抑制实验表明FPI为金属蛋白酶，而FPII为丝氨酸蛋白酶，AAS结果表 明每分子FPI含有1．0个Zn离子。FPII具有比FP I更强的纤溶活性，前者约 是后者的2倍，两者都不具有类凝血酶活性、酪蛋白水解活性、精氨酸酯酶活 性、出皿活性和毒性等。FP II的这些理化和生物活性表明FPII可能是～潜在的 溶栓效果比FPI更好的抗血栓药物。 I和 与来自同一蛇毒的同属于凝血因子IX／凝血因子X结合蛋白家族的ACF ACFII相比较，FP I和它们的氨基酸组成十分接近，理化性质和酶、生物活性 也较多相似之处，但FP I具有显著的纤溶活性，ACFI和ACFII则具有较强的 抗凝血活性，因此提出推测：FPI和ACF I、ACFII可能来源于同一祖蛋白， 而蛋白质序列方面的进化导致结构的微小改变，从而产生了具有纤溶活性或抗 凝血活性的亚群。 应用荧光光谱技术，特别是应用同步荧光光谱技术，研究了FPI和FPII的 I的构象变化和其活性之间的关系。FP1分子 构象，系统研究了pH诱导的FP 中嗣科学