浅析丹皮酚、丁香酚、胡椒碱经皮微透析体内外回收率的研究.docVIP

浅析丹皮酚、丁香酚、胡椒碱经皮微透析体内外回收率的研究 本文档格式为WORD,感谢你的阅读。 最新最全的 学术论文 期刊文献 年终总结 年终报告 工作总结 个人总结 述职报告 实习报告 单位总结 演讲稿 浅析丹皮酚、丁香酚、胡椒碱经皮微透析体内外回收率的研究 　　回收率包括绝对回收率和相对回收率。绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。相对回收率严格来说有两种。一种是回收试验法，一种是加样回收试验法。前者是在空白基质中加入药品，标准曲线也是同此，这种测定用得较多，但有标准曲线重复测定的嫌疑。第二种是在已知浓度样品中加入药物，来和标准曲线比，标准曲线也是在基质中加药物。 　　[摘要] 建立活血止痛膏中有效成分丹皮酚、丁香酚、胡椒碱微透析体内外回收率校正方法，为其经皮药动学研究提供依据。利用高效液相色谱法测定透析液中丹皮酚、丁香酚、胡椒碱的浓度，并计算微透析探针回收率;研究浓度、校正方法对3种成分微透析探针回收率的影响，并考察探针吸附性、体内外回收率的稳定性和重复性。结果表明，以30%乙醇生理盐水作为灌流液时，探针对3种成分均无明显的吸附，短时间内即可从探针上被完全洗脱下来;在8 h 内，3种成分体内外回收率均能保持稳定;交替用含药溶液和空白灌流液灌流探针3次，3种成分体内外回收率基本不变。不同质量浓度丹皮酚(2.46～53.64 mg?L-1)、丁香酚(4.26～32.15 mg?L-1)和胡椒碱(5.75～45.87 mg?L-1)体外回收率分别为(45.7±4.66)%，(41.3±3.96)%，(27.82±2.95)%，即3种成分的探针回收率对浓度没有依赖性;在相同条件下，零净通量法、透析法和反透析法所测得的探针体外回收率几乎相等。因此，采集部位药物的浓度可用体外测得的回收率或在体回收率进行校正。同时也证明了该研究建立的微透析方法可用于活血止痛膏的经皮药动学研究。 　　[关键词] 微透析; 丹皮酚; 胡椒碱; 丁香酚; 探针回收率 　　活血止痛膏应用历史悠久，能够活血止痛、舒筋通络，临床上广泛用于筋骨疼痛、肌肉麻痹、痰核流注、关节疼痛等的治疗。其中牡丹皮Paeonia suffruticosa Andr.为方中君药，与当归、川芎等配伍能够活血化瘀止痛，胡椒Piper nigrwm L.，丁香Eugenia caryophyllata Thunb.等辛温之品，加强散寒止痛之功。丹皮酚(paeonol，Pae)、丁香酚(eugenol，Eug)和胡椒碱(piperine，Pip)分别是牡丹皮、丁香和胡椒的主要活性成分，均为活血止痛膏中的有效成分[1]。通过检测局部给药后有效成分的吸收，来判断在一定时间内组织、器官中药物的浓度是否达到治疗量，可以指导经皮药用辅料、载药体系及给药方法的优选及应用。 　　本研究建立丹皮酚、丁香酚、胡椒碱体内外微透析回收率的测定方法，考察将微透析技术应用于活血止痛膏经皮药动学研究的可行性，为活血止痛膏经皮药动学评价提供依据。 　　一、材料 　　Waters e2695高效液相色谱仪(2998 PDA检测器，四元梯度泵，控温自动进样器，柱温箱，溶剂脱气机，Empower工作站);Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);微透析系统，包括Pump 11 Elite 型微量注射泵(HARVARD APPARTUS)，2.5 mL 玻璃注射器(Hamilton)，CMA 30 线性微透析探针(CMA，半透膜长度为1 cm，截留相对分子质量6 000);KQ5200DA数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);1 mL 一次性注射器(常州悦康医疗器材有限公司);津腾尼龙66孔径0.45 μm微孔滤膜;TK20B型透皮扩散试验仪(上海锴凯科技贸易有限公司);MP5002型电子天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司)。 　　丹皮酚对照品(中国食品药品检定研究院，批号110708201407);丁香酚对照品(中国食品药品检定研究院，批号110725201414);胡椒碱对照品(中国食品药品检定研究院，批号110775201405);丹皮酚药品(成都曼斯特生物科技有限公司和中国科学院成都生物研究所研制，批号MUS;丁香酚药品(SigmaAldrich公司，批号STBC6086V);胡椒碱药品(成都曼斯特生物科技有限公司和中国科学院成都生物研究所研制，批号MUS。甲醇(Fisher公司，色谱纯);纯净水(娃哈哈集团有限公司);乙酸(Fisher公司，色谱纯);无水乙醇(北京化工厂，分析纯)，其他试剂均为分析纯。 　　二、方法与结果 　　2.1 透析液中Pae，Eug及Pip 含量测定方法的建立 　　2.1.1 色谱