2010动物实验的基本技术1.pptVIP

动物实验的基本技术 机能学实验室 课程内容 动物的饲养 1、饲料 1.1 饲料的一般要求 1）饲料应写明供应单位,而且供应单位必须取得实验动物配合饲料生产 许可证；（生产合格） 2）饲料应清洁干净、新鲜、无杂质、无异味、无霉变、无发酵、无虫蛀及鼠咬。不得加入抗生素、驱虫剂、防腐素、色素、促生长剂以及激素等添加剂； （品质合格） 3）实验动物饲料中营养成分指标应满足不同动物需求 （满足不同需求） 4）饲料应定期监测，主要包括营养成分的测定和微生物的检测。 5）购买饲料时，需要分清楚饲料的种类：维持饲料与生产、繁殖饲料。 动物的饲养 1.2 实验动物特殊需求 1）小鼠大鼠配合饲料：饲料要求有一定的硬度。正常饲育外，通常定期补充蛋黄、黄豆等高蛋白物质和葵花子等物质。 2）兔配合饲料：对粗纤维要求含量高，可适当添加一些青绿饲料或干绿饲料。 3）豚鼠配合饲料：自身不能合成VitC，需补充，通常通过添加青菜来实现，也可在饮水中添加，可同时添加复合VitB。 动物的饲养 2、饲喂 1)定时定量喂养。 2)专人喂养，以便更好地掌握每个动物群体的食量变化，控制好饲料的用量，做到既不浪费，又能较好地满足动物正常生长发育的需要。 3、饮水 1)清洁级以上动物饮用水应进行高压灭菌处理或过滤处理，并随时注意水质变化，定期检测水质。 2)大中动物房舍内应设自动饮水设备，要让每只动物能饮到足够的水。 动物的管理 1.实验动物的一般管理要求 观察记录： 摄食情况、 饮水情况、 精神状态、 粪尿形态、 皮肤被毛光泽等 动物的管理 2、实验动物从业人员个人防护要求 1）在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。 2）在进行可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。 3）在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。 4）禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。 三、动物实验技术操作规范 1、实验动物的选择 1.1 与国际接轨——“3R” 1)减少(Reduction)：提高动物质量，减少试验用的动物数量和试验的次数，获得同样多的信息。 2)替代（Replacement）：尽可能采用可以替代实验动物的替代物。如：细胞组织培养、计算机模拟、物理、化学方法、细胞芯片 3)优化（Refinement）：人道主义管理，提倡实验动物福利保护，严禁粗暴对待或虐待实验动物，减少动物在实验过程中的痛苦与不安。 1、实验动物的选择 1.2 实验动物选择原则 科学研究、医疗实践、生物制品的生产和检定都离不开实验动物，为了保证实验结果的科学性、重复性，必须选择标准化及与实验目的相适应的实验动物。 1.选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物 2.选用结构简单又能反映研究指标的动物 3.选择适龄的实验动物 1、实验动物的选择 1.3 具体考虑到： 种属、品系、 个体（性别、年龄、生理状态、健康状况） 1、实验动物的选择 判断哺乳动物健康状况的外部特征： 1.一般状态：发育良好，眼睛有神，爱活动，反应灵活，食欲良好。 2.头部：眼结膜补充血，瞳孔清晰。眼鼻部均无分泌物流出。呼吸均匀，无罗音，无鼻翼扇动。不打喷嚏。 3.皮毛：皮毛清洁柔软而有光泽，无脱毛，无蓬乱现象。皮肤无真菌感染表现。 常见医药学中实验动物的选择 2、动 物 实 验 技 术 2.1 实验动物的抓取和固定 2.2 实验动物的编号 2.3 实验动物的麻醉方法 2.4 实验动物的给药方法 2.5 实验动物的液体样品采集方法 2.6 实验动物的处死、剖检与取样 2.7 尸体、废弃物的处理 2.1 实验动物的抓取和固定 基本原则：保证人员绝对安全，防止动物损伤，禁止粗暴对待实验动物。 大，小鼠的固定 豚鼠 兔 兔 其他实验动物 2.2 实验动物编号、标记 意义：区分不同的动物个体 1）染色法：大、小鼠。 2）打孔法：兔、豚鼠。 3）剪缺口法：小型猪。 4）挂牌法：犬、猴、猫等大中动物。 5）烙印法：犬、兔（数字号码钳） 1）染色法 常用的涂染化学药品有： 红色：0.5％中性红或品红溶液 黄色：3％～5％苦味酸溶液 1+5＝６ 2）打孔或剪缺口法 2.3 实验动物的麻醉方法 （一）常用的麻醉药 1.常用局部麻醉剂： 1）普鲁卡因：毒性小，见效快，用时配成0.5％～2％； 利多卡因：见效快，组织穿透性好，常用1％～2％溶液作为