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甲壳寡糖对力竭运动小鼠红细胞免疫粘附与抗氧化功能影响 　　摘要：为了研究甲壳寡糖对力竭运动小鼠红细胞免疫粘附功能和抗氧化功能的影响。对4周龄昆明种小鼠随机分为对照组、运动组、甲壳寡糖组。运动组和甲壳寡糖组进行4周的游泳训练，最后一次进行力竭游泳后即刻采用心脏取血，肝素抗凝，测定红细胞免疫粘附功能及红细胞抗氧化功能指标。结果发现：实验4周后，甲壳寡糖组RBC-C3bRR和RBC-SOD活性明显高于运动组(P 　　关键词：抗氧化；甲壳寡糖；小鼠；力竭运动；红细胞免疫粘附功能；自由基代谢 　　中图分类号：G804．7 文献标识码：A 文章编号：1007―3612(2006)11―1503一02 　　甲壳寡糖是甲壳质或壳聚糖降解为壳寡糖，是由2～10个氨基葡糖通过β－1，4糖苷键连接而成的低聚糖，有较好的溶解性和生物活性。已有研究证明，甲壳寡糖具有增加人体免疫力，抑制肿瘤、调节血脂、活化肠道双歧杆菌及解毒排毒等多种生理功能；还可清除体内多种自由基，保护机体细胞免受氧化损伤。有研究显示，力竭运动易致机体免疫机能的降低和自由基损伤，可能是运动性疲劳产生的重要机制。因此，保护机体的免疫机能和预防自由基损伤成为当今抗疲劳研究中又一着眼点，尤其是中医药及天然生物资源应用于抗疲劳显示出良好的效果。本研究观察甲壳寡糖对力竭运动小鼠红细胞C3b花环率(RBC－C3bRR)、红细胞IC花环率(RBC－ICR)、红细胞SOD活性和MDA含量，观察甲壳寡糖对小鼠红细胞免疫粘附功能及自由基代谢的变化。探讨甲壳寡糖对运动后红细胞免疫粘附和抗氧化机能的影响，为研制新的抗疲劳保健食品，开发利用天然甲壳寡糖资源提供参考。 　　 　　1　材料与方法 　　 　　1．1实验动物与分组4周龄昆明种健康小鼠，雌雄各半，体重(32．80±2．42)g，由广东医学院实验动物中心提供(粤检证字99A053号)，按完全随机方法分为对照组、运动组、甲壳寡糖+运动组(甲壳寡糖组)，每组10只，分笼饲养，自由饮食，室温18－24℃。 　　1．2运动方式运动组、甲壳寡糖组进行4周的无负重游泳运动，水温(28±2)℃，水深35 em，每周游6d。第1周每天游30 min，第2周每天游60 min，第3周每天游90 min，第4周每天游120 min。第4周末进行力竭性游泳，记录力竭时间。力竭标准为小鼠沉入水中超过10s，且小鼠在平面上无法完成翻正动作。 　　1．3药物及给药方法 甲壳寡糖粉剂，脱乙酰度≥90％，分子量1000－3000，由上海伟康生物技术有限公司提供。服药组采用灌胃法，均按体表面积比率折算等效剂量，用药量为0．3g／kg体重给药，每天灌胃1次，运动组以等体积生理盐水灌胃，时间为4周。 　　1．4指标测定运动组、甲壳寡糖组小鼠力竭运动后即刻和对照组小鼠采用10％氨基甲酰乙酯(10 mL／kg或1g／kg体重)经腹腔注射麻醉，心脏取血，肝素抗凝。1．4．1红细胞免疫功能测定采用郭峰等建立的红细胞C3b受体(RBC―C3bR)花环试验和红细胞免疫复合(RBC－IC)花环试验。以RBC粘附2个以上(含2个)酵母多糖为一朵花环，匀衡计数200个RBC，计算出花环率。酵母多糖冻干试剂由第二军医大学长海医院血液免疫室提供。1．4．2 RBC―SOD活性和RBC―MDA含量测定 RBC―SOD活性采用黄嘌呤氧化酶法；RBC―MDA含量采用TBA比色法。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，严格按说明书制备红细胞抽提液测定SOD活性和MDA含量。血红蛋白定量采用高铁氰化法。1．5数据处理所有数据均以　表示，并采用方差分析进行均数间差异显著性检验，及组间两两比较。显著性水平P≤0．05。统计学处理均在SPSS 10．0计算机统计软件上完成。 　　 　　2　结果 　　 　　2．1 甲壳寡糖对力竭运动小鼠RBC―C3bRR、RBC―ICR的影响表1显示甲壳寡糖组RBC―C3bRR显著高于运动组(P0．05)。 　　 　　3　讨论 　　 　　红细胞膜上的天然免疫分子通过促进单个核细胞产生细胞因子参与免疫调节，或通过免疫粘附作用参与免疫复合物的清除，是机体天然免疫的一个重要的子系统，是自身免疫平衡和稳定的重要基础，在整个免疫反应中起着重要的作用。当人们发现运动应激对人体免疫机能产生抑制后，红细胞的免疫功能及免疫调控便引起了运动医学和运动人体科学界的广泛关注。有研究发现红细胞和白细胞对补体调理过的免疫复合物有相同的结合率，但血液循环中90％以上的C3b受体存在于红细胞的表面，认为血循环中被补体调理过的抗原和免疫复合物几乎都是与红细胞结合运至肝、脾被巨噬细胞清除，构成了机体免疫系统中的重要组成部分。对于红细胞免疫粘附功能的测定，国内多采用RBC―C3bRR测定以检测RBC―