中国南海三种芋螺毒素的分离及判定.pdfVIP

中国南海三种芋螺毒素的分离及鉴定 摘要 芋螺属腹足纲软体动物，全世界约有500-700种，遍布世界各暖海区，我 国有芋螺100余种，主要分布在西沙群岛、海南岛及台湾海域。芋螺毒素由芋螺 毒液管和毒囊内壁的毒腺所分泌，每种芋螺的毒液中含50--200个活性多肽，且 每种芋螺的毒素序列极少重叠。芋螺毒素多数由10--40个氨基酸残基组成，富 含二硫键，可作用于各种离子通道和受体的类型及亚型。它们不仅可以直接作为 药物，还可作为理想的分子模板用于发展新药先导化合物，对神经生物学也具有 重要意义。本论文旨在研究发现及鉴定新的芋螺毒素种类，从织锦芋螺，堂皇芋 螺和大理石芋螺中分离、纯化、鉴定新的芋螺多肽，为进一步研究它们的生理及 药理功能奠定基础。 我们于2007年4月在我国南海地区采集了三种芋螺，进行芋螺毒素的分离、 纯化和鉴定。 在芋螺毒素的初分离阶段，采用G．25凝胶层析、离子交换、RP．HPLC相结 合的纯化方式对三种芋螺中的芋螺毒素进行分离纯化，共获得了53种芋螺毒素， 其中包括23种织锦芋螺毒素，25种堂皇芋螺毒素和5种大理石芋螺毒素。对分 离纯化的芋螺毒素进行了HPLC分析，证实了获得的芋螺毒素的纯度均达到85％ 以上。 在芋螺毒素的鉴定试验中，我们首先用基质辅助激光解析飞行时间质谱 采用了Edmall降解及四极杆．飞行时间串联质谱两种测序方法，对新发现的芋螺 毒素进行了序列分析，共得到17个新的芋螺毒素序列，包括8个织锦芋螺毒素 序列、8个堂皇芋螺毒素和1个大理石芋螺毒素序列，并对它们的序列特点及可 能存在的生物活性进行了初步分析。 关键词：芋螺毒素：分离；鉴定；织锦芋螺；堂皇芋螺；大理石芋螺 Isolationandcharacterizationofthreeconotoxinsfromthe SouthChinaSea Abstract Conesnailsare mollusksdistributedinall marine predatorygastropod tropical habitatwith500-700allovertheworld．Thereareabout100COnUS in species species distributedin islandsandTaiwanwaterareas． China,mostly Xisha,Hainan Conotoxinsarcsecretedvenomductandtheca．Conusvenomhas50～200 by differentbioactivewithlittle between peptides overlap contain10--40aminoacidresidueswithrichdisulfidebondandcould aseries target ofionchannelsor arcnot into receptersubtypes．Conotoxinsonlydevelopeddire砝ly alsousedas and for drugs，but perfectdesign neurobiologieal drug templatesprobes researches．111isresearchisto and newconotoxinsfromCOnll$ identify