中草药有效成分测定及其抗氧化感化.pdfVIP

摘 要 中草药以其丰富的资源、独特的疗效、毒副作用少，安全性高， 等特点，己成为目前抗自由基药物的研究热点。本研究的目的是研究 一些中草药的有效成分，并筛选出具有清除自由基功能的中草药自由 基清除剂，保护DNA等生物大分子免受损伤，维护机体正常生理功 能。 本文利用LC．MS皿订S联用技术对水溶性迷迭香提取物中的有效 成分进行了测定，并对阿魏酸、银杏提取物、茶多酚、迷迭香提取物、 甘草次酸提取物、绞股兰提取物、三七总皂甙等天然中草药提取物清 除氧自由基和对DNA损伤保护作用进行了研究，取得了一些新的结 果。主要内容如下： 1．LC。MS／MS法同时测定水溶性迷迭香提取物中迷迭香酸、阿魏 酸、咖啡酸含量 建立了一种快速同时测定水溶性迷迭香提取物中迷迭香酸、阿魏 酸和咖啡酸含量的液相色谱一串联质谱①C．MS／MS)定量分析方法。 使用三级四极串联质谱(MS／MS)作为印?Lc的检测器，对水溶性迷迭 香提取物中迷迭香酸、阿魏酸和咖啡酸三种化合物进行分离测定。三 种分析物在研究范围5～500 ng／tnL线性良好(r0．999)，方法的检出 限均在5ng／mL以内。对50n卧儿的迷迭香酸、咖啡酸和阿魏酸溶液进 行11次平行测定，相对标准偏差艰SD)分别为2．7％3．5％和4．8％。每 个样品分析时间为3min。本方法操作简便、灵敏度高、分析速度快， 可以应用于水溶性迷迭香提取物中迷迭香酸、阿魏酸和咖啡酸含量的 同时测定。 2．七种中草药提取物清除氧自由基活性研究 建立了一种流动注射化学发光检测羟基自由基的方法，具有分析 速度快，精度高，容易实现自动化和连续分析等优点。用所建立的方 法和次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶一鲁米诺体系比较了七种天然中草药提 取物清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的能力，其清除羟基自由基 提取物2．95肛∥ml，迷迭香提取物6．24p咖l，甘草次酸提取物 氧阴离子自由基的半抑制浓度(IC50)分别为茶多酚O．042肛g，ml，阿魏 草次酸提取物1．68肛咖l，绞股兰提取物14．08肛咖l，三七提取物 167肛g，m1。结果表明七种中草药提取物都具有清除羟基自由基和超氧 阴离子自由基的能力，其中以阿魏酸和茶多酚最强，三七总皂甙最弱。 3．三种中草药提取物对DNA氧化损伤保护作用研究 迷迭香、银杏三种植物提取物对DNA氧化损伤的保护作用。在本实 验条件下，阿魏酸、迷迭香、银杏三种植物提取物均能有效抑制DNA 损伤发光，并使DNA损伤发光峰延迟时间变长，在本体系中阿魏酸、 迷迭香、银杏三种植物提取物对DNA损伤发光的半抑制浓度IC50分 别为0．24p∥“、1．63IIg枷、3．0p∥ml。结果表明，阿魏酸、迷迭香、 Ⅱ 银杏三种植物提取物兼属预防型和断链型抗氧化剂，对DNA的保护 作用为阿魏酸优于迷迭香，迷迭香优于银杏。 关键词：中草药提取物：液相色谱一质谱；自由基，化学发光；DNA Ⅲ ABSTRACT in Interest antioxidantsfromnaturalsourcestoclean employing free l radicalsis enhancedconsumerconcernsaboutthe considerablyby toxic effectsof chineseherbs．Freeradicals syntheticantioxidants，specially canattack with DNA,react induce diseases．This