肾功实验本科PPT
参考值: 24小时尿量为1000~2000ml; 12小时夜尿量不应超过750ml; 最高尿比重1.020 昼尿量与夜尿量之比为3~4:1; 尿液最高比重与最低比重之差不应少于0.009 临床意义: (1)少尿,加高比重见于血容量不足引起的肾前性少尿; (2)多尿(2500ml/24h),低比重尿,夜尿增多,或比 重固定在1.010,表明肾小管浓缩功能差。 一、血清尿素、肌酐、尿酸的测定 非蛋白氮化合物: 尿素、尿酸、肌酐、肌酸、氨、氨基酸、核苷酸等 测定的意义: 非蛋白氮化合物是体内蛋白质、肌酸、核酸等的代谢产物, 均由肾脏排泄,在一定程度上反映了肾脏的功能,是临床常用 的肾功能指标。 (一)血清尿素的测定 血清尿素水平在一定程度上反映了肾小球的滤过能力。 1.测定方法 直接法:二乙酰一肟法 间接法:脲酶法 (1)二乙酰一肟法(直接法): 540nm处有吸收峰 (Fearon反应) (2)脲酶法(间接法) 第一步: , 首先利用脲酶催化尿素水解生成铵盐,铵盐在碱性条 件下释放出氨。然后再用不同的方法测定铵盐或氨,在测 定过程中需防止外源性氨的污染。 酶偶联速率法: 第二步: 纳氏试剂显色法: 或 酚-次氯酸盐显色法: (波氏法) 或 2、方法学评价 二乙酰一肟法: 灵敏度高、操作较为简便线性范围较窄(<150mmol/L) 特异性不高;本法难以实现自动化,目前临床上已很少使用。 脲酶法: 特异性强,反应专一,易受体液及环境中氨的干扰,因此测定时需严防外源性氨的污染。一般用于手工操作测定,适合基层单位开展;但试剂稳定性差。 酶偶联速率法: 准确度和灵敏度较高,多用于自动分析系统,试剂较贵 电导法:准确性高,反应所需时间很短,适合自动化分析,但规范实验条件有一定困难。 【参考范围】 血清3.0~7.2mmol/L (速率法) 尿液357~535mmol/24h(速率法) 【临床意义】 由于肾脏有强大的储备能力,因此,仅在肾小球滤过率下降至正常的50%以下时,血浆或血清中尿素浓度才会升高,故该指标灵敏度不高,不能作为早期肾功能指标。尿素作为肾脏功能指标,还会受到许多肾外因素的影响。各种原因如肝功能衰竭等导致血清氨水平升高,都会使尿素测定的结果偏高。 血清尿素和血清肌酐浓度与GFR的关系见图14-2。 (二)血清肌酐的测定 外源性肌酐 内源性肌酐 在控制外源性肌酐摄取时,测定血清肌酐可作为肾滤过功能的指标。 1.测定方法 (1)Jaffe反应法(苦味酸法):肌酐与碱性苦味酸作用,生成 黄红色化合物,在510nm处比色分析。 (2)酶偶联速率法: 在340nm处监测吸光度值的降低,可测量肌酐含量。 2.方法学评价 Jaffe反应法 是测定肌酐常用的方法,适用于血、尿标本的检测。但最 大的问题是非特异性干扰大(假肌酐)。 特异性高,适用于自动化分析。但试剂价格昂贵且不易保存。 酶偶联速率法 假肌酐:一些具有还原性能与碱性苦味酸生成红色的物质 维生素C、丙酮、乙酰乙酸、α-酮酸、葡萄糖、蛋白质以及头孢菌素类抗生素、强心甙、甲基多巴等 排除假肌酐的干扰: ①吸附法 ②速率法 ③二次读数法 ④在手工操作中制备无蛋白滤液或加入十二烷基硫酸钠去除 蛋白质干扰,在连续流动自动化生化分析仪中可采用透析器 清除蛋白质。 ⑤在缓冲液中加入硼酸盐消除葡萄糖、维生素C的干扰。 【参考范围】 血清44~133μmol/L (速率法) 尿液(苦味酸法)婴儿 88~176mmol/kg·24h 儿童44~352mmol/kg·24h 成人 男7~18mmol/24h 女5.3~16mmol/24h 【临床意义】 血清肌酐浓度较血清尿素浓度更能准确地反映肾小球的功能。在临床上同时测定血清肌酐浓度和血清尿素浓度,在鉴别肾前性或肾后性尿毒症上有一定意义。 3.内生肌酐清除率 在控制外源性肌酐摄取的情况下,体内肌酐产量恒定,并且由于前述肌酐在肾脏中的排泄方式,故临床上通过内生肌酐清除率近似地反映肾小球滤过功能,称为内生肌酐清除率。 内生肌酐清除率 肾清除率: 指单位时间内多少毫升血浆中的某物质经肾脏清除。 若某物质由肾小球滤过后,既不被肾小管重吸收又不被肾小管所分泌,那么它的肾清除率可以反映肾小球滤过率(GFR)。 (1)测定方法 ①受试者禁食肉类三天,试验日禁用茶、咖啡,停用利尿剂,试验前避免剧烈运动,饮用足量的水,使尿量不少于1ml/min。 ②准确收集24小时尿,记录尿量、身
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