04 基因表达调控PPT.ppt

（1）外显子选择（optional exon） （2）内含子选择 （optional intron） （3）互斥外显子（mutually exclusive exon） （4）内部剪接位点（internal splice site） 2．选择剪接对基因表达的调控作用 （1）Bax基因转录产物的选择剪接 Bax基因的编码产物是与细胞凋亡有关的分子 Bax基因编码产生的蛋白质有几种（α、β、γ等），结构略有差异，差异的产生来自于mRNA的选择剪接。 alternative splicing of mRNA from bax gene （2）选择剪接产生的IκBγ NF-κB是一种广泛存在的反式作用因子，可与很多基因的上游启动子元件或增强子内部的κB元件结合而调节基因的表达。 ? NF-κB与IκBγ结合时，以无活性的NF-κB/IκBγ复合体（105 kD）存在于胞浆。 IκBγ基因表达时，通过选择剪接，使IκBγ mRNA中的178个或67个密码子删除，引起阅读框架移动，产生两种具有新C末端的蛋白异构体，即IκBγ1和IκBγ2。 在IκBγ1和IκBγ2中缺失了一个蛋白激酶 A 识别位点，该位点的磷酸化调节IκBγ的活性。 mRNA的编辑(mRNA editing) 指转录后的RNA在编码区发生碱基的加入、丢失或转换等现象，是在mRNA水平改变遗传信息，能改变表达产物的性质。 原生细胞线粒体细胞色素氧化酶亚基 II基因转录后的RNA编辑 DNA 5‘—AAA GTA GAG AAC CTG GTA---3’ --- Lys Val Glu Asn Leu Val --- 编辑后mRNA-AAA GUA GAU UGU AUA CCU GGU --- Lys Val Asp Cys Ile Pro Gly-- ? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 人类apoB基因 mRNA（14500个核苷酸） 肝脏 apo B100 （分子量为500,000） 肠道细胞 apo B48 （分子量为240,000） mRNA编辑 机制：尚不清楚。研究人员已经发现线粒体转录一类特殊的RNA分子，其3?端有一段 poly(U), 其5?端序列与mRNAs被编辑的区域互补，被称为引导RNA（guide RNA）。引导RNA可能作为编辑过程的模板，并将其3?端的U转移给被编辑的mRNAs。 （三）mRNA运输的控制 mRNA的运输是受到控制的。 mRNA通过核膜的运输是一个主动运输过程，核膜上的核孔是大约9-nm的通道，但可以运输大于9 nm的颗粒，如核糖体（15 nm）。核糖体均在核内组装，再运输到胞浆。RNA从核运输至胞浆的运输调控的机理目前还不清楚。 转录起始复合物的形成： T82A97T93A85（A or T）100A83（A or T）83 效率 ? H E A TBP B F J （二）反式作用因子 1．反式作用因子（trans-acting factor） 真核细胞内含有大量的序列特异性的DNA结合蛋白，其中一些蛋白的主要功能是使基因开放或关闭，称为反式作用因子。 反式作用因子识别特定的DNA序列（通常8～15个核苷酸），与DNA结合后，可以促进（正调控）或抑制（负调控）一个邻近基因的转录。 2．反式作用因子的主要特点 ① 一般具有三个功能结构域: DNA识别结合域，转录活性域，结合其他蛋白的结合域。 ② 能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件。 ③ 对基因表达有正性和负性调控作用，即激活和阻遏基因的表达。 3. 反式作用因子结构域的模式 （1）DNA结合域（DNA-binding domain） 1）锌指结构 2）同源结构域 3）亮氨酸拉链结构 4）螺旋-环-螺旋结构 5）碱性α-螺旋 1）锌指结构（zinc finger motif） 是指DNA结合域中含有较多半胱氨酸和组氨酸的区域，借肽链的弯曲使 2 个 Cys和 2 个 His 或4 个 Cys 与一个 Zn++ 络合成的指状结构。 Zn Cys