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抗菌药物敏感试验 临床病原生物学教研室 抗菌药物敏感性试验 纸片琼脂扩散法 经世界卫生组织推荐,目前各国临床微生物学实验室广泛采用的标准纸片扩散法是由Kirby和Bauer所建立的纸片琼脂法,即Kirby-Bauer法(K-B法纸片琼脂扩散法) 实验原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度,在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈.抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度. 目的要求 1.掌握纸片扩散法的原理、操作方法、结果判读和临床意义 2.熟悉纸片扩散法的质量控制。 器材与试剂 1.菌种：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌 2.培养基：M-H培养基 3.试剂：无菌生理盐水、0.5麦氏比浊管、药敏纸片 4.其他：无菌棉拭、镊子、毫米尺、接种环 操作步骤 1.取分纯待测菌菌落(直径1mm)数个置于生理盐水管中，校正浓度为0.5麦氏标准，校正后菌液15min内接种。 2. 用无菌棉拭子蘸取菌液,在管内壁将多余菌液旋转挤去后在琼脂表面均匀涂布接种3次,每次旋转平板60度,最