长春新碱.ppt

长春新碱发酵 Content 前言 长春新碱的发酵过程 产品研发前景展望 Introduction Fermentation Process 内生菌的分离 按常规无菌操作，取长春花不同部位的叶和茎干，按下列程序表面消毒，自来水冲洗→75%酒精漂洗（3~5分钟）→无菌水冲洗3~4次→0.1%升汞冲洗（10~30s） →无菌水冲洗五次。 Fermentation Process 将上述处理过的叶片和茎在超净台条件下切割成约0.5cm×0.5cm的小片（茎取韧皮部），然后将小片种植于PDA平板上，置28摄氏度温箱培养3到7天后，即见样品切割过的边缘有菌丝生长出，经纯化后转接到PDA斜面上备用。 Fermentation Process Fermentation Process 内生菌的培养 种子培养基: 液体培养基，将纯化菌株接种到培养基中培养种子菌,3d 后,取5 mL 液体种子菌转入发酵罐中发酵。 发酵培养基：2.8L 和10L 小罐发酵方法：以3%接种量将种子培养液接入已灭菌(2.8L 小罐进行实罐灭菌,10L 罐先空消,再用无菌压缩空气吹干后加入灭过菌的培养基)、冷却的发酵培养基中，100 r/ min ，28℃通风培养16~18d，定期测定发酵液中长春新碱含量、生物量、总糖和pH 值。 Fermentation Process 鉴定和提纯 鉴定：可采用紫外分光光度法和高效液相色谱分析（HPLC）检测 提纯:发酵液→碱化（PH>8）→离心 （2500r/min） →沉淀→氯仿→浓缩 Outlook 综上所述，VCR在临床上主要用来治疗ALL，疗效确切，但单用易出现不同程度的骨髓抑制、感染、出血，还有较大的神经系统毒性和局部刺激性等，另外，长期使用易出现多药耐药现象等毒副作用，故在一定程度上限制了它在临床上的使用。为了减轻VCR在抗白血病中出现的毒副作用和耐药，今后应该在以下方面进行深入研究。 毒副作用方面：①降低VCR的剂量联合其他化疗药进行联合化疗；②寻找恰当的载药体，使其具有载药量高、载药范围广、稳定性好、体内滞留时间长、体内导向分布以及提高生物利用度和降低毒副作用等特点；③优化其对神经系统毒性的化学基团。 MDR方面：①耐药机制，从分子生物学角度看，已发现许多因子参与白血病MDR，但其机制还需进一步研究；②寻找更好的耐药逆转剂。根据其发病机制，针对性地设计出一些特异的干预手段，提高白血病细胞对VCR的敏感性，是当前白血病耐药研究的首要课题。但MDR的发生机制是复杂多样的，采用某一种化疗药来达到目的是不切合实际的。对付白血病MDR宜用综合治理措施，而中药的成分多且复杂，其抗肿瘤作用可能是通过多途径、多靶点而起作用：复方君子汤、三七总皂苷对K562/VCR，人参皂苷Rb1和川芎嗪对HL-60/VCR具有一定的逆转作用就是很好的例子。所以今后中药逆转VCR诱导的白血病MDR值得深入研究。总之，如果解决了VCR的毒副作用及MDR问题，就能充分发挥老药VCR的药学效果，更好地为白血病患者服务。 专业：药物化学 学号：MG1230089 姓名：张鑫 Methyl-(1R,9R,10S,11R,12R,19R)- 11-(acetyloxy) 化学式：C46H56N4O10 CAS号：57-22-7 长春新碱能抗癌，疗效比长春碱约高10倍，可用于治疗急性淋巴细胞性白血病，疗效较好，对其他急性白血病、何杰金氏病、淋巴肉瘤、网状细胞肉瘤和乳腺癌也有疗效。与长春花碱、泛洛洛新及泛洛洗汀等一起含在蔓长春花中的生物碱。具有使细胞分裂（有丝分裂）在中期停止的作用，这与秋水仙素相似，但其作用比秋水仙素更强。与秋水仙素一样可以与微管蛋白结合而抑制其生物活性，但结合部位不同。另外它与秋水仙素不同的是对微管蛋白以外的蛋白质如肌动蛋白及10纳米细丝蛋白等也起作用。在临床医学上作为抗癌剂之一而被应用，特别是对造血器官的肿瘤比较有效。长春碱硫酸盐可用于治疗何杰金氏病和绒毛膜上皮癌，疗效较好；对淋巴肉瘤、网状细胞肉瘤、急性白血病乳腺癌、肾母细胞瘤、卵巢癌、睾丸癌、神经母细胞瘤和恶性黑色素瘤等也有一定疗效。 --------《抗肿瘤药学手册》 Introduction 长春新碱抑制微管蛋白 Introduction 长春新碱药代作用 Introduction 分离得到的内生菌菌落75CG3 75CG