智能生物显微镜-厦门大学医学院中心室.DOC

智能正置生物显微镜 操作规程 Olympus BX53 厦门大学医学院中心实验室 黄静茹 2017年3月 正式操作仪器之前请注意如下事项： 首先要在仪器预约保护时间内及时使用本人注册的校园卡刷卡开始实验。 1、查看仪器使用记录本，如之前使用者有记录仪器异常情况，请不要开机使用。 2、查看仪器整体有无异常，周围环境是否正常，需要时要开启室内空调。检查并清空除湿机水箱。 3、查看仪器使用记录本及刷卡机“日历”，如之前使用者刚刚关机，请等候10分钟以上再开机使用。 一、开机 打开显微镜主机开关①和手控面板电源； 打开电脑，进入 cellSens Standard工作站； 二、明场观察（Bright Field BF） BF主要用于HE染色、免疫酶标标本 1、正确放置标本（正置显微镜）； 2、从软件上或手控面板上选择观察模式“BF”； 3、将光路选择杆④推到第二档（ 选择目镜观察与CCD成像光路并用）； 4、在工作站上物镜栏目中选用合适的物镜，根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩； 调节亮度调节旋钮②至合适的照明强度， 调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦至最 佳焦面观察，进行CCD成像。 三、CCD成像 1、cellSens Standard工作站中，,点击左侧摄像控制中的实时观察； 2、调节粗/细调焦旋钮进⑧行聚焦； 3、曝光：可先选择自动曝光，参照自动曝光时间，再通过手动调节曝光时间使 图像更清晰； 4、背景校准：执行白平衡 ，在样品空白背景处画一个小区域，软件自动以该处为背景对整幅图像进行调整，使所选区域显示为白色； 5、各成像参数设定完毕后，点击拍照 ，仪器自动成像； 6、右键文档工具栏窗口或在文件处进行保存（TIF或JPG格式）。 四、相衬观察（Phase contrast PH) PH主要用于没有任何染色的、较透明的标本 1、正确放置标本； 2、从软件上或手控面板上选择观察模式“PH”；从软件上选用合适的物镜； 3、观察相衬光学元件与所用物镜是否相匹配（见表1）； 4、将光路选择杆④推到第二档（ 选择目镜观察与CCD成像光路并用）； 5、调节亮度调节旋钮②至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧进行聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩。 表1 物镜、相差元件匹配表 物镜 10X、20X 40X 100X 相差元件 PH 1 PH 2 PH3 6、若需明场成像，参照“三、CCD成像”。 五、图像处理 1、标尺：点击“视图”---标尺，软件自动将标尺加在图像上，再点击“图像”----印入信息，保存即可。 2、测量：点击“测量”----测量工具，软件左侧显示出测量工具栏，点击选择 所需的测量工具，在图像上画目标区域，右键点击结束测量即可显示结果。 测 量结果可导出Excel：点击测量工具栏图标 。 3、图像叠加：打开拟叠加的图，“图像”----组合彩色图像----“可用图像”中 选择拟叠加的图----√合并层----确认。 4、图像拼接：按一定顺序 拍摄图像，相邻两张图像的边缘要部分重叠， 所有图像拍摄完毕后，选择视图---工具窗口---画廊---全选拟拼接的图像， 选择运算---图像拼接---设置水平方向图像数量---根据拍摄顺序摆好图像 位置---确定；预览后视情况选择“裁剪边缘”---确定。 六、关机 1、关机前请查看放在实验台上的刷卡机“日历”，如紧接着有其他人员将使用该仪器，无需关机，联系后面使用者。 2、实验完毕，退出工作站； 3、数据上传：将待上传的实验结果文件夹添加为压缩包，再将其复制到桌面上的“云存储文件夹”中。 4、将透射光光强调节钮③逆时针旋至最低，通过手控面板上的“Objective”旋出使用过的物镜，用无水乙醇擦拭镜头；将物镜转盘转至空位； 5、关闭主开关①及手控面板电源，清理载物台及桌面； 6、关电脑及显示器。 七、注意事项 1、软件上如果没有显示“摄像控制”，通过以下方式调出：视图---工具窗口--- 摄像控制。 2、油镜使用完毕，需用擦油镜液擦拭，再用无水乙醇擦拭。 3、显微镜使用完毕，灯箱尚未恢复到室温，勿盖上防尘罩！ 离开实验室之前切记要及时使用本人注册的校园卡刷卡结束实验。 5 主开关 亮度调节旋钮 滤色片调节 光路选择钮 夹片器 X/Y轴旋钮 物镜转盘 微/粗调焦旋钮； 双目观察筒 屈光度调节环 聚光镜高度调节钮 聚光镜对中旋钮 孔径光阑调节环 视场光阑调节环 粗调焦限位杆 ECO指示灯 ECO/正常模式转换开关 亮度预置开关 人体传感器 状态指示灯