基因转录表达调控PPT.pptVIP

;Francis Crick在1958年提出中心法则，指出信息传递是单向过程，一 旦转变为蛋白质，就不会从蛋白质转回到核酸分子，但遗传信息可 以从核酸到核酸或从核酸到蛋白质. 遗传信息从DNA经过RNA传递到蛋白质的过程称为基因表达 （gene expression）。 任何能较为直接影响转录和翻译过程开启/关闭及发生速率的因素及 其作用过程，称为基因表达调控(regulation of gene expression)。 可以在多层次或水平上进行，如转录起始，转录延伸，转录终止及翻 译前/后等，但最主要也是最有效的调控是转录起始调控。;转录过程与DNA复制过程非常相似，都会在特定酶的催化下合成一条与DNA摸板 互补的新核苷酸链，但有以下区别： 1）转录过程产生的新链由核糖核苷酸组成，而复制产生的新链则是由脱氧核糖 核苷酸组成； 2）催化合成RNA的聚合酶不需要引物，可以从头（de novo）起始转录. 在细胞内 转录是从一段特定的DNA序列起始并转录某一特定的DNA区段。 3）产生的RNA产物并不与模板DNA保持大范围碱基配对，而是仅仅在酶活性中 心部位保持一段8个核苷酸的互补区，已经合成的其它区段被从DNA模板上 置换出来。既可以保证翻译的同时进行，也可以允许一个基因同时被几个聚合 酶所转录，从而保证短时间内产生大量转录产物。 4）精确率低于复制过程（10-4 Vs 10-8） ;一、RNA聚合酶 J Harowitz与S Weiss分别在1960年首次发现以DNA为模板的RNA聚合酶，可催化如下反应： ;T.aquatics ;Channels into and out of the open complex;二、转录过程 整个转录过程可以分为三个阶段：1）转录起始(initiation)；2）转录延伸(elongation)； 3）转录终止(termination) 1）DNA中一段特定序列（启动子）被RNA聚合酶所结合，形成一个闭合复合物 （closed complex）；闭合复合物或在其它蛋白质因子作用下,或自发地发生结构改 变，形成一开放复合物（open complex），此过程为不可逆过程，不需要ATP水 解；在开放复合物中, 一段围绕转录起始点约14bp（+3～-11）的区段发生解链， 形成“转录泡（transcription bubble）”结构。相应于最初的两个核苷酸随后进入酶 活???位点，被催化形成磷酸二酯键并继续进行其它核苷酸的合成。在RNA链最初 10个核苷酸的合成中，RNA聚合酶易从模板链上脱落，合成效率较低, 此阶段称为 流产转录(abortive trancription)；一旦合成的RNA链长度10nt, 聚合酶可以与DNA、 RNA形成稳定的三维复合结构，进入转录延伸阶段，这一转变过程称为启动子逃 离（promoter escape）. ;①启动子 原核生物核心酶理论上可以识别结合DNA分子上的任何一个位点;但 在细胞内只会从特定启动子序列起始转录。这种特异性是通过可以对启动子 序列特异性识别结合的σ因子来完成。在大肠杆菌中最主要的σ因子为σ70。 被σ70识别的启动子具有下面特点： 1）具有两段保守序列，序列中心点分别距转录起始点为10bp及35bp，称为-10区 及-35区； 2）通过比较各种被σ70识别的启动子序列发现，不同启动子-10区及-35区序列非 常相似，存在一个共有序列（concensus sequence），其中-10区序列为TATAA T, -35区序列为TTGACA; 3) 两个保守区的间隔距离为17-19bp. ;The phases of transcription cycle;;Promoter consensus sequence and spacing consensus;σand αsubunits recruit RNA polymerase core enzyme to the promoter; 2)当RNA聚合酶成功脱离启动子后，进入转录延伸阶段（transcription elongation）. 未转录的DNA双链从两蟹爪交接处进入聚合酶, 并分别进入酶分子中各自通道, 在 离开聚合酶后又重新恢复双链结构. 转录延伸中的RNA分子只有8～9nt与模板DNA 互补,其余的RNA链则从模板链上剥离, 并通过RNA通道离开RNA聚合酶. 在延伸过 程中, RNA聚合酶具有