基因的表达与调控(上)PPT.pptVIP

第七章 基因的表达与调控（上） ——原核基因表达调控模式;1.原核基因表达调控总论 2. 乳糖操纵子与负控诱导系统 3. 色氨酸操纵子与负控阻遏系统 4. 转录水平的其他调控方式 5. 转录后调控;7.1 原核基因表达调控总论;;7.1.1 原核基因调控分类 □负转录调控（negative transcription regulation） 调解基因的产物是阻遏蛋白（repressor），起着阻止结构基因转录的作用 根据其特征又分为： 1）负控诱导：阻遏蛋白（活性）不与效应物（诱导物）结合时， 结构基因不转录。 2）负控阻遏：阻遏蛋白（非活性）与效应物结合时 （阻遏蛋白转变为活性状态）结构基因不转录。 □正转录调控（positive transcription regulation） 调解基因的产物是激活蛋白（activator） 1）正控诱导系统：诱导物的存在使激活蛋白处于活化状态 2）正控阻遏系统：效应物的存在使激活蛋白处于非活化状态 ;负控阻遏系统;7.1.2 原核基因调控的主要特点 1. 可诱导调节 指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由原来关闭的状态 转变为工作状态，即在某些物质的诱导下使基因活化。 例子：大肠杆菌的lac操纵子 可诱导基因；可诱导酶；酶的诱导合成 2. 可阻遏调节 这类基因平时都是开启的，处在产生蛋白质或酶的工作过程中， 由于一些特殊代谢物或化合物的积累而将其关闭，阻遏了基因的表达。 例子：大肠杆菌的Trp操纵子 可阻遏基因；可阻遏酶；可阻遏现象；阻遏物 □一般规律：可诱导的操纵子总是一些编码糖和AA分解代谢蛋白的基因， 这些操纵子常常是关闭的；可阻遏基因正好相反，他们是一些合成各种 细胞代谢过程中所必需的小分子物质的基因，这些基因常常是打开的。;7.1.3 弱化子对基因活性的影响 在这种调节方式中，起信号作用的是有特殊负载的AA-tRNA的浓度， 是转录调节中的微调整。 当操纵子被阻遏，RNA合成被终止时，起终止转录信号作用的那一段 核苷酸被称为弱化子。 例子：Trp操纵子的弱化作用 7.1.4 降解物对基因活性的调节 在葡萄糖存在的情况下，即使在??菌培养基中加入乳糖、半乳糖等诱导 物，与其对应的操纵子也不会启动，不会产生出代谢这些糖的酶，这种现象 称为葡萄糖效应或降解物抑制效应。 降解物抑制作用是通过提高转录强度来调节基因表达的。 7.1.5 细菌的应急反应 应急反应的信号：ppGpp和pppGpp。 产生这两种物质的诱导物是空载tRNA。;7.2 乳糖操纵子与负控诱导系统;调节基因 控制部位 结构基因;7.2.1 乳糖操纵子模型 1）Z、Y、A基因的产物由同一条多顺贩子的mRNA分子所编码 Z基因：编码β-半乳糖苷酶 Y基因：编码β-半乳糖苷透过酶 A 基因：编码β-半乳糖乙酰基转移酶 2）该mRNA分子的启动区（P）位于阻遏基因（I）与操纵区（O）之间，不能 单独起始半乳糖苷酶和透过酶的高效表达 3）操纵区（O）是DNA上的一小段序列（仅为26bp），是阻遏物的结合位点。 4）当阻遏物与操纵区结合时，lac mRNA的转录起始受到抑制。 5）诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵区结合，从而 激发lac mRNA的合成 □这一模型仅解释了lac体系的负控系统，在lac操纵子同样存在正调控！;β-半乳糖苷酶;7.2.2 lac操纵子的影响因子 1. lac操纵子的本底水平表达 □问题： 1）诱导物需要穿过细胞膜才能与阻遏物结合，而转运诱导物需要透过酶， 透过酶的合成又需要诱导。 第一个诱导物是如何到达细胞的？ 2）乳糖（G-1,4-gal）并不与阻遏物结合，真正的诱导物是异乳糖（ G-1,6-gal ） 而异乳糖是在β-半乳糖苷酶的催化下由乳糖形成的。 乳糖诱导β-半乳糖苷酶的合成需要β-半乳糖苷酶的预先存在！ □对这一现象的解释： 在非诱导状态下有少量的lac mRNA合成（大约每个世代中有1-5个mRNA 分子） 这种合成被称为本底水平的永久型合成;□研究诱导作用时很少适用乳糖，而用乳糖类似物 1）异丙基巯基半乳糖苷（IPTG） 2）巯甲基半乳糖苷（