外源基因表达调控1PPT.ppt

第三部分 外源基因在转基因植物细胞内的表达调控;起始密码边周序列（initial code） 翻译增强因子（Ω ） 密码剂量效应(codon bias) ;第三部分 外源基因在转基因植物细胞内的表达调控;3.外源基因瞬时表达的影响因素 （1）质粒DNA的结构 （2）内源核酸酶的影响 （3）受体细胞生理状态 (4) 内源GUS酶抑制剂 4.外源基因瞬时表达的应用 （1）在基因转化研究中的应用 a.农杆菌转化能力的检测 b.优化基因转化条件 （2）植物基因表达调控的研究 5.外源基因的稳定表达 外源基因在植物细胞中的稳定表达的条件 a.时间长 b.无迅速衰退现象 c.分子杂交证明DNA已经整合到植物基因组中 d.能遗传，并符合分离规律 ;第三部分 外源基因在转基因植物细胞内的表达调控;二.转化外源基因的同源性和异源性表达 2.原核生物基因在植物细胞中的表达 原核与真核基因在表达机制上有很大的差异，因此细菌的基因直接导入植物细胞是不能表达的。即使采用了植物基因的表达调控系统，没有改造的细菌基因也只能很低水平的表达。 例：Bt.δ-毒蛋白抗虫基因 表达量仅占植物可溶蛋白总量的0.001% 达不到抗虫的目的。原因是，mRNA结构中可能隐含有poly A信号AAUAA序列及内含子切割序列等，从而造成mRNA在不适当的位置上断裂而降解。 向植物中引入Bt基因的改造。在不改变氨基酸序列的情况下，改变了20%的碱基序列，提高了GC 含量，使其在植物中的表达由原来的0.001%提高到0.05~0.1%（提高了50-100倍） 。抗虫效果明显提高。;向植物中引入Bt基因的改造修饰原则：;三.转录调控序列对外源基因表达的影响;*;;三.转录调控序列对外源基因表达的影响;;;;;三.转录调控序列对外源基因表达的影响;三.转录调控序列对外源基因表达的影响;CaMV 35S启动子;二.转录调控序列对外源基因表达的影响;;TGACGTAAGCACATACGTCA -123~114 Z-DNA;;;;;fgfh;cdgfg;hjkhhjh;二.转录调控序列对外源基因表达的影响;;组成型启动子;