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实训二 显微镜油镜的使用与细菌形态观察
实训三 细菌细胞的特殊染色法 ——革兰氏染色 （一）实验目的 1、学习微生物涂片、染色的操作技术； 2、掌握革兰氏染色的方法； 3、初步掌握无菌操作技术； 4、掌握革兰氏染色反应原理、操作步骤和意义。 （二）实验内容及原理 1.简单染色法 只用一种染料使细菌着色以显示其形态，不能辨别细菌细胞的构造，通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红 等）使其着色。 2.革兰氏染色法 是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法是细菌学上最常用的鉴别染色法，因为通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类。 1 2 3 4 ？ 结晶紫 碘液 酒精 复红 革兰氏染色的机理： 主要由于两类细菌的细胞壁成分和结构不同。 菌种：培养12-16h的枯草杆菌 染色液和试剂：草酸铵结晶紫染液、卢哥氏碘液、95%酒精、蕃红染液、二甲苯溶液、香柏油、无菌水 器材：废液缸、洗瓶、载玻片、接种杯、酒精灯、擦镜纸、显微镜等。 （三）实验器材 制片→初染（结晶紫1min）→水洗→媒染（碘液1min）→水洗→脱色（乙醇20-30s）→水洗→复染（番红2min）→水洗→干燥→观察 (四）实验方法： （1）制片：取菌种培养物常规涂片、自然干燥、加热固定； 注意无菌操作 crystal violet stain wash with water Stain with grams iodine solution Decolorize by adding 95% alcohol 革兰氏阴性杆菌 革兰氏阳性杆菌 Counterstain with Safranin * *
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