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冷沉淀在不同温度不同时间放置对Ⅷ因子影响 　　[摘要]　目的　探讨制备冷沉淀的不同时间及不同温度对Ⅷ因子的影响，为制备冷沉淀选择最佳时间、温度和指导临床输注发挥作用。　方法　随机抽取6　h内制备成的新鲜冰冻血浆（FFP）200　mL/袋的A与B，用离心法制备成冷沉淀20～25　mL，各自分别抽取2　mL放入5个不同编码的无菌试管内。A组（A1、A2、A3、A4、A5）于24℃室温放置，B组（B1、B2、B3、B4、B5）于4℃放置，AB两组分别在0、3、5、7、9　h观察测定。　结果　冷沉淀主要含Ⅷ因子、纤维蛋白原、VWF、第Ⅴ因子以及纤维结合蛋白等，但主要成分是Ⅷ因子，其稳定性差，在24℃的室温和4℃放置，随时间变化而变化。　结论　控制制备时间、温度和临床使用冷沉淀的放置时间、融解时间及温度、运输过程冷链、确保血液成分有效，对减少血液浪费十分重要。 　　[关键词]　冷沉淀；制备；时间；温度；Ⅷ因子 　　[中图分类号]　R457 [文献标识码]　A [文章编号]　1674-4721（2012）12（c）-0090-02 　　冷沉淀是200　mL全血分离的新鲜冰冻血浆（FFP）100　mL，制备成的白色絮状物，20～30　mL为1个单位，内含Ⅷ因子≥40　IU/U，纤维蛋白原≥75　mg/U。自采血日起有效期1年。冷沉淀用于预防和治疗出血及凝血功能障碍疾病，包括甲型血友病、血管性假性血友病、先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及第Ⅷ因子缺乏症等[1-2]。 　　1　仪器与方法 　　1.1　仪器 　　美国贝克曼J6-MA大型低温离心机、韩国产摇摆式低温融化箱CT-4T6C、-53℃低温速冻机，-30℃血浆保存机、37℃恒温水浴箱、无菌接驳机、热合机、日本制造自动凝血因子检测仪（CA-50）、成都协和生物技术中心生产的凝血因子促凝性检测试剂。 　　1.2　方法 　　3　讨论 　　A组（A1、A2、A3、A4、A5）和B组（B1、B2、B3、B4、B5）各自是同源血分出的冷沉淀，每组在相同温度、不同时间段检测冷沉淀Ⅷ因子变化更具有指导意义。冷沉淀Ⅷ因子极不稳定，在室温24℃和在4℃放置3　h后Ⅷ因子减弱都明显。因此，笔者认为制备时无论是在室温24℃，还是在4℃，融化箱都要控制制备时间小于3　h，这样冷沉淀Ⅷ因子减弱少　。水浴离心法100　mL/袋的新鲜冰冻血浆最好在2　h内完成制备；200　mL/袋的新鲜冰冻血浆，在2　h　30　min内完成制备，并及时放入速冻机速冻，-30℃保存。本站目前冷沉淀的发放量增长迅速，有时甚至供不应求。为满足临床需要，保证冷沉淀的质量，采取的措施包括：选择健康的献血者，做好采血前采中的护理，采血400　mL在6　min内完成，采血200　mL在3　min内完成，减少采血时血流不畅针头堵塞，影响制备的冷沉淀质量。如果外出采血就及时把血放入4～6℃容器内贮存。采血后在6　h内完成制备成新鲜冰冻血浆（FFP）。制备新鲜冰冻血浆的离心条件是：转速3　800　r/min，时间13　min，温度4℃，刹车档4，离心机预温，保证血液在离心机时温度在2～4℃，离心后轻轻垂直取出，放在分浆夹分出上层血浆，血浆经两次离心后摆平摆疏放入-53℃速冻机，-30℃保存。新鲜冰冻血浆制备冷沉淀时，融化箱内加入圆形冰块，并用手不停旋转，加快冰溶解速度，当温度达到8℃时，取出冰块，放入提前5　min从-30℃冰箱取出的新鲜冰冻血浆，融化箱内温度保持4℃，并专人监测箱内温度变化。夏天，南方温度较高，融化箱内温度间中超过4℃时，及时放回装有冰块的篮子，使温度控制在4℃。离心机预温要达到0℃。融化箱内的血浆大约融化到一半时用手轻轻地捏碎，有少量冰渣时，工作人员相互合作，　快速装杯、平衡、离心。离心条件：转速4　200　r/min，温度0℃，时间10　min，刹车档为4。从离心机轻轻垂直取出，移去上面血浆，血袋底下剩20～30　mL白色絮状物，为冷沉淀。迅速放入-53℃速冻。冷沉淀制备从开始到最后入库速冻，都是多人共同完成。缩短了冷沉淀制备时间，包括在室温、融化箱、离心机的时间，保障了冷沉淀在室温和4℃放置的质量。贴标签时少量取出，并用大毛巾覆盖，避免了冷沉淀自然溶解导致的Ⅷ因子减弱；血库发血和运输按要求控制好冷链，特别是离血站路途遥运的山区医疗单位，运送时用隔热泡沫塑料箱[3-4]，封闭包装，防止冷气外漏，造成冷沉淀溶解，不能输注，浪费血液；指导临床用冷沉淀时，冷沉淀在水浴箱的温度不能超过37℃。温度超过37℃，会破坏所有凝血因子和蛋白质[5-6]。融化时间7～　8min，融化后尽快输注，确实无法及时输注的在4℃放置，时间不超过3　h，融化后不用的不冻结再用，在临床输注上，时常出现融化后的冷沉淀因输注不及时而作为失效血液废弃对