基因工程第二章基因克隆所需的工具酶.pptxVIP

第二节 天然DNA的制备天然DNA的来源染色体DNA、病毒和噬菌体DNA、质粒DNA、线粒体和叶绿体DNA天然DNA的提取准备生物材料裂解细胞分离和抽提DNA苏州科技学院生物系 叶亚新第三节 限制性核酸内切酶和DNA片断化限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列．并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶一? . 限制性内切酶的发现 1.?细菌限制修饰系统的发现 Werner Arber于1962-1968年发现，1968年分离到I型限制酶。 2. 限制酶HindII的发现 H．O．Smith 和Wilox 于1970年首次从流感嗜血杆菌（H. influenzae）中发现并分离到HindII限制酶。 3. SV40 限制图谱和转录图谱的绘制 D. Nathans（1971年）用HindII绘制SV40的限制酶谱。 苏州科技学院生物系 叶亚新二、限制修饰系统的种类1.?I型：由三个基因构成，hsdR；hsdM；hsdS（host specificity for DNA restriction modification and specificity）位于染色体上，三个基因构成一个复合体，限制酶需要ATP、Mg2+、SAM（５—腺苷甲硫氨酸）。2.?II型：限制与修饰基因产物独立