产甲烷菌菌落特性及分子生物学研究PPT.ppt

Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota METHANOGEN Euryarchaeota 产甲烷菌菌落特性及分子生物学研究 厌氧发酵微生物概述 1 产甲烷菌分类及代谢途径 2 产甲烷菌富集与纯化 3 微生物群落研究方法 4 分子多样性研究 5 内 容 厌氧发酵微生物概述 不产 甲烷菌 产甲烷菌 纤维素降解细菌 半纤维素降解细菌 淀粉降解细菌 脂肪降解细菌 产琥珀酸丝状菌 溶纤维丁酸弧菌 白色瘤胃球菌 牛链球菌 溶脂厌氧弧菌 产氢产乙酸菌 同型产乙酸菌 挥发酸生成菌群 基质分解菌群 沃尔夫互营单细胞菌 中温丙酸氧化菌 伍德乙酸杆菌 乙酸梭菌 嗜热自养梭菌 嗜甲基丁酸杆菌 提供生长和产甲烷所需要的基质 创造适宜的氧化还原电位条件 为产甲烷菌清除有害物质 厌氧发酵微生物的发展史 1901-1903年巴斯德研究所的Maze 马氏甲烷球菌. H A Barker 发现沼气发酵分为产酸和分解酸形成甲烷两个阶段 1950 美国 R. E .Hungate 发明厌氧培养技术 1868 Bechamp 甲烷形成是微生物学过程 1899 俄国 奥姆良 将厌氧分解纤维的微生物分为两类 1916奥氏甲烷杆菌 1901荷兰 Sohngen氢和二氧化碳的混合气能发酵成甲烷 1967 Bryant 采用改进Hungate技术纯化产甲烷菌 1972 三阶段理论 1974 Bryant首次提出了产甲烷菌(Methanogen)一词 更先进的技术 更完善的体系 …… 产甲烷菌的生物学特性 专性厌氧 1 生长繁殖困难 2 -320mV下正常生长 -160mV 下生长缓慢 遇氧停止生长甚至死亡 十几天~几十天才出现菌落 菌落一般圆形、透明、边缘整齐 菌落特别小，很容易遗漏。 可利用的底物很少： CO2、H2、乙酸、甲醇、甲基胺等 产甲烷菌的分类 根据可利用底物 根据生长温度 氢营养型：利用氢气和二氧化碳 乙酸盐营养型：乙酸 甲基营养型：甲醇、三甲基胺、二甲肽硫化合物以及其他的一些醇如异丙醇、异丁醇、乙醇、环戊醇 嗜冷产甲烷菌：Topt 25℃了 苔原湿地、湖底沉积物 嗜温产甲烷菌：Topt ≈ 35℃ 厌氧消化器、淡水沉积物 嗜热产甲烷菌：Topt ≈ 55℃ 海底沉积物、热泉等 极端嗜热产甲烷菌：Topt 80℃ 产甲烷菌甲烷生产途径 H2/CO2途径 乙酸途径 甲基途径 CO2 + H2 → CH4 + 2H2O ΔG′0= -131 kJ 4CH3OH → 3CH4 + CO2 + 2H2O ΔG′0= -319 kJ CH3COO- + H2O → CH4 + HCO3- ΔG′0= -31 kJ CO2 + H2 → CH4 + 2H2O ΔG′0= -131 kJ 4CH3OH → 3CH4 + CO2 + 2H2O ΔG′0= -319 kJ CH3COO- + H2O → CH4 + HCO3- ΔG′0= -31 kJ 产甲烷菌的分类 颗粒污泥外观特征 颗粒污泥表面的菌群 马氏甲烷球菌 巴氏甲烷八叠球菌 甲酸甲烷杆菌 产甲烷菌的分类 产甲烷菌显著影响因子 第一PPT模板网，PPT素材下载 /sucai/ 微量元素缺乏会导致VFA高，气体产率下降。 对毒性物质具有拮抗作用 使反应器内优势菌种发生变化 使乙酸利用率提高数倍。 微量元素 硫酸盐还原细菌和产甲烷细菌存在竞争关系，二者都以氢、乙酸、乳酸等为电子供体。 硫化氢致害浓度为50 mg·L-1，驯化后的500 mg·L-1。 硫酸盐 最适pH值6.8 ~ 7.4 pH值的变化可引起微生物体表面的电荷变化，影响培养基中有机化合物的离子化作用 酶只有在最适宜的pH 值时才能发挥最大活性。 产甲烷菌最适宜的Eh为-350 mV 或更低，过高则停止生长甚至死亡。 中温Eh 应低于-300~-380 mV 高温厌氧消化系统-500~-600 mV pH值 氧化还原电位(Eh) 产甲烷菌富集与纯化方法 样品采集 繁殖培养 纯化分离 纯度检验 水沉积物、沼泽、苔原、稻田、