仪器分析绪论及色谱基础PPT.ppt

Ex： 在采用低固定液含量柱，高流速进行快速色谱分析时，采用下列哪一种气体作为载气，可以改善气相传质阻力？ A、氮气； B、氢气 ；C、氦气；D、二氧化碳 （B） Ex: 当载气线速较小时，范式方程中分子扩散项起控制作用，采用哪种气体做载气对提高柱效有利？ A、氮气； B、氢气 ；C、氦气 （A） 载气流速与柱效——最佳流速 载气流速高时： 传质阻力项是影响柱效的主要因素，随着流速的提高，柱效下降。 载气流速低时： 分子扩散项成为影响柱效的主要因素，随着流速的增加，柱效提高。 u 在上述方程各项中存在矛盾，因此，应求出最佳值： u Hmin uopt 速率理论的要点 被分离组分分子在色谱柱内运行的多路径、浓度梯度所造成的分子扩散及传质阻力使气液两相间的分配平衡不能瞬间达到等因素是造成色谱峰扩展柱效下降的主要原因。 通过选择适当的固定相粒度、载气种类、液膜厚度及载气流速可提高柱效。 速率理论为色谱分离和操作条件的选择提供了理论指导。阐明了流速和柱温对柱效及分离的影响。 各种因素相互制约，如载气流速增大，分子扩散项的影响减小，使柱效提高，但同时传质阻力项的影响增大，又使柱效下降；柱温升高，有利于传质，但又加剧了分子扩散的影响，选择最佳条件，才能使柱效达到最高。 Ex 1.根据范第姆特方程，分别写出A, B和C的表示的意义，并推导出最小塔板高度和最佳流速。 2.长度相等的二根色谱柱，其范第姆特常数如下： 如果载气流速是0.50 cm·s-1，那么，这两根柱子给出的理论塔板数哪一个大？ 柱1的最佳流速是多少？ A B C 柱1 0.18cm 0.40cm2·s-1 0.24s 柱2 0.05cm 0.50cm2·s-2 0.10s 分离度 塔板理论和速率理论都难以描述难分离物质对的实际分离程度。即柱效为多大时，相邻两组份能够被完全分离。 难分离物质对的分离度大小受色谱过程中两种因素的综合影响： 保留值之差──色谱过程的热力学因素 区域宽度──色谱过程的动力学因素 Ex 衡量色谱柱柱效能的指标是（塔板数） 衡量色谱柱选择性的指标是（r2.1） 色谱分离中的四种情况如图所示： ① 柱效较高，选择性较高,完全分离； ②选择性不是很大，柱效较高，峰较窄，基本上完全分离； ③柱效较低，选择性较高,但分离的不好； ④选择性不是很大，柱效低，分离效果更差。 分离度：指相邻两色谱峰保留值之差与两峰底宽平均值之比。（分辨率、分辨度） R1：两峰不完全分离 R=1：两峰明显分离 R=1.5：两峰完全分离 R更大时：两峰分离更好 基本色谱分离方程式 令Y (1) = Y (2)（相邻两峰的峰底宽近似相等），引入相对保留值和塔板数，可导出下式： R:衡量色谱柱的总分离效能指标 则： 若用n代替n有效： 则： 分离度与塔板数和柱长的关系 固定相确定后，k和r21确定，被分离两组分的相对保留值和分配比不随n、L变化，则： 毛细管气相色谱的出现和发展 1979年，Dandeneau和Zerenner 首次报告了用熔融二氧化硅做毛细管柱的研究，开始了熔融二氧化硅做毛细管柱材料的时代。 弹性石英柱有几个显著的优点:柔韧性好，易于连接安装;内表面惰性好，金属离子杂质少，对固定液的催化分解作用小,对一些极性和氢键型化合物吸附性弱，拖尾小;与玻璃相比，石英表面易于通过硅烷化处理,使各种极性的固定液形成均匀的液膜因而柱效很高。 反相色谱的出现 1948 年，马丁想使用液相色谱分离长链脂肪酸，但是现有的方法是使用极性固定相，并以非极性的剂作洗脱剂 ( 即现在所说的正相色谱 )，得不到好的结果。所以 Martin 就开始研究不同的两相系统，例如使用弱极性的固定相，实验了各种可能性，但是还是不满意：也就是要找到一种理想的疏水性载体做固定相。最后找到用二氯二甲基硅烷蒸汽来处理硅藻土的产物，这一物质不会被极性溶剂所湿润。利用这种固定相作色谱柱及相应分离体系，可以分离脂肪酸。于是在 1949 年就产生了所谓“反相液相色谱并首先用这种方法分离了月桂酸 ( C12 ) 到 硬脂酸 ( C18 ) 的脂肪酸系列。 反相色谱的出现 但在后来的 20 多年里这种广泛使用的反相液相色由于缺少适当的固定相，并对这一物理化学现象理解不深阻碍了这一方法的发展。但是在 70 年代上半段情况发生了很大的变化，即解决了反相液相色谱固定相的制备，使反相液相色谱成为液相色谱中主导的方法。 二、色谱分析基础 应知应会: 了解色谱流出曲线和术语 理解柱效率的物理意义及其计算方法 理解速率理论方程对实际分离的指导意义 掌握分离度的计算方法，及影响分离度的重要色谱参数 定量方法 色谱法的定义 色谱法或色谱分析(c