分子微生物学2013.3.26PPT.ppt

;课程教学主要内容（理论22学时） 第1章 绪论（2学时） 第2章 基因∕基因组的结构特点（2学时） 第3章 基因表达调控（4学时） 第4章 分子生物学研究方法（DNA、RNA、蛋白质操作技术）（8学时） 第5章 分子生物学研究方法（基因功能研究技术）（2学时） 分子生物学读书报告（4学时） ;课程教学主要内容（实验18学时）;课程教学主要内容（实验18学时）;朱玉贤 李毅Microbiology 郑晓峰.现代分子生物学(第3版) [M]. 北京：高等教育出版社，2010;课程大纲：;第1章 绪论;学科地位;分子生物学的三大支撑学科;第一节、分子生物学的发展和概念;人类对生命现象的认识;人类对生命现象的认识;21世纪生命科学发展的重要态势;二、分子生物学的概念;蛋白质及核酸等生物大分子结构和功能的研究都属于分子生物学的范畴，即从分子水平阐明生命现象和生物学规律;第二节、 DNA是遗传物质;DNA是遗传物质 实验;;实验表明：;第三节 分子生物学研究内容和发展简史;生物技术;二、分子生物学发展史;;;;;遗传信息传递的中心法则 （Central Dogma）;;; 1965 Jacob ＆ Monod （法国）; 1975 Temin Baltimore(美) 诺贝尔生理医学奖;Frederick Sanger ; 1984 Kohler（德） Milstein（美） Jerne（丹麦） 诺贝尔生理医学奖; 1988 McClintock (美); 1989 Altman ＆ Cech（美）诺贝尔化学奖;1993年-2001年 在分子生物学领域 均有诺贝尔生理医学奖或诺贝尔化学奖获得;技术上的3大发明;基因工程（技术）诞生的第2个技术准备有了切割与缝合（连接酶）基因DNA，还没一个“车子”，将重组DNA送到主细胞中去。从1946年起，Lederberg就研究细菌性因子，即F因子，50～60年代相继发现了R因子（抗药性因子）、COE（大肠杆菌因子）等质粒。直到1973年，Cohen才将质粒作为基因工程载体使用，这是基因工程的第2个技术准备。;3. 逆转录酶的发现;人类基因组研究;目前及今后相当长时期内，将在基因研究、基因表达调控研究、结构分子生物 学研究、信号传导等四大前沿领域开展深入持久的工作，并由此开拓新的前沿领域和新的生长点。;分子生物学的发展前景光辉灿烂，道路艰难曲折！;第2章 基因∕基因组??结构特点;1、基因的概念和结构;基因的化学结构;DNA和RNA和化学组成;2、基因组结构;基因组结构的特点;基因组结构的特点;;基因组结构的特点;基因的转录调控序列;大肠杆菌基因及调控序列;终止子（terminater）;3、操纵元件（operator）;4、正调控蛋白结合位点;启动子的上游有CAP蛋白识别位点，CAP被cAMP激活后，能够结合于该识别位点，激活下游结构基因的转录。;真核生物的转录调控序列;;真核生物的转录调控序列;第3章 基因的表达与调控;基因表达调控的基本概念 克隆基因的表达 原核基因调控机制;第一节 基因表达调控的基本概念;二、基因表达的方式; 1、组成性表达： ; 2、适应性表达;三、基因表达的规律 ——时间性和空间性;;2、空间特异性(spatial specificity);四、基因表达调控的生物学意义;第二节 克隆基因的表达;一、基因的表达过程;一、基因的表达过程;一、基因的表达过程;;;外源基因;二、外源基因在原核中表达;（一）大肠杆菌作为表达外源基因受体菌的特征;（一）大肠杆菌作为表达外源基因受体菌的特征;（二）原核生物基因表达的特征;;3、转录和翻译偶联、连续进行;4、不含内含子，缺乏转录后的加工系统。 5、调控主要在转录水平上。一是起始控制（启动子控制），二 是终止控制（衰减子控制）。 6、mRNA的核糖体结合位点。 含有一个起始密码子和一段同核糖体16SRNA 3ˊ末端碱基互补的序列，SD序列。;（三）原核表达系统的注意事项;（四）影响外源基因表达效率的因素;（四）影响外源基因表达效率的因素;（四）影响外源基因表达效率的因素;（四）影响外源基因表达效率的因素;（五）提供表达水平常用的方法;;（五）提供表达水平常用的方法;（五）提供表达水平常用的方法;（五）提供表达水平常用的方法;蛋白质分泌的条件;三、外源基因在真核细胞中的表达;（一）真核表达的优点;（二）真核基因表达调控特点;（二）真核基因表达调控特点;（三）基因表达调控模式;（三）基因表达调控模式;（四）真核表