DNA的粗提取与鉴定18PPT
粗提取与鉴定;1、你所知道的生物大分子有哪些?;;①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下, DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?;当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L时,DNA的溶解度最大,浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出。;DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离;DNA的鉴定;试剂;;(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液;(三)去除滤液中的杂质;(四) DNA的析出与鉴定;2、DNA的鉴定:
取两支20mL的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL
将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂(要现配现用,否则会影响鉴定的效果。 )。
混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min。
待试管冷却后,比较两支试管中溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。;有丝状物的试管变成蓝色,另一试管还是原来颜色;整个实验共“两次蒸馏水,三次过滤,两次析出,六次搅拌”;③两次析出
第一次:用0.14 mol/L 的NaCI溶液含杂质多 第三步
第二次:用冷却的95%的酒精
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