第一章遗传的物质基础dna.pptx

教学目的 ： 学习分子遗传学的基本理论，重点是遗传物质在分子水平上的遗传信息流向和基因表达调控。利用分子遗传学的基本理论指导相关科研工作。 教学组织： 教师讲述和学生自学结合。 成绩评价： 课程论文 （ 50%）；按指定题目在规定时间内完成。 闭卷考试（50%）。 参考书籍： 分子遗传学。南京大学 分子遗传学，张玉静 95年以后出版的分子生物学 教材或专著;第一章 遗传的物质基础――DNA DNA is the genetic material;原核细胞和真核细胞;一、DNA所带的遗传信息 作为遗传物质所应具备的条件 多样性 贮存并表达多种遗传信息 连续性 准确传递后代 稳定性 物理、化学性质稳定 多变性 有遗传变化的能力 ;DNA是遗传物质的证明 1928年 Griffith的肺炎球菌对小鼠的转化;1944年 Avery对肺炎球菌的转化;1952 Hershey 等利用噬菌体的捣碎试验;1952年 病毒重组;真核细胞 的基因转化;1953年 Watson和Crick，DNA双螺旋模型 ;核酸之外的遗传物质 克雅氏病－－1913 库鲁病（kuru）－－1950 羊搔痒病（scrapie）－－1959 疯牛病－－1985 共同特征：退行性神经疾病，影响大脑功能，大脑细胞死亡。过滤性因子，可感染，能被蛋白质酶灭活，但不能被核酸酶或UV灭活，朊病毒（prion） ，即蛋白质样的感染粒子;遗传信息 负责蛋白质氨基酸组成的信息――结构基因 基因选择性表达的信息――调控基因 高等生物的结构基因占基因组的10-15%，占基因组80%以上的DNA有什么作用？无准确的回答。与基因表达的调控有关。 ;二、DNA的一级结构 DNA分子中的核苷酸排列顺序 通过测序确定 拟南芥，水稻，人类、家蚕 一般写法：5‘pApCpApGpT3’ ACAGT ;A;三、DNA的二级结构; Watson-Crick的DNA双螺旋的特征 主链 右手双螺旋，脱氧核糖和P为骨架，位于外侧，反向平行螺旋,直径￠2nm 碱基配对 位于内侧，嘌呤和嘧啶（A-T,G-C） 螺旋参数 任一条链绕轴一周的升降的距离。3.4nm，10对核苷酸，相邻碱基0.34nm。 大沟和小沟 骨架双链在螺旋轴上的间距不等，在DNA表面形成宽窄不等的大小沟。 大沟宽2.2nm，是蛋白质识别DNA双螺旋结构上的特定信息位点。 小沟宽1.2nm。 ;;决定双螺旋稳定的因素 1、氢键 结构的稳定性与G+C的含量成正比，G-CA-T. 2、碱基堆积力 嘌呤和嘧啶具疏水性,产生疏水区而与介质分开,使碱基与水的接触为最小。 3、其他 带负电荷的磷酸基与介质中的阳离子形成离子键,可有效地屏蔽磷酸基间的静电斥力。 ;四、DNA物理结构的不均一性 富含A+T的序列 AT含量在染色体的不同区域不同，螃蟹卫星DNA的AT含量高达97%。AT区域对复制和转录的起点很重要。 嘌呤和嘧啶的排列顺序 碱基组成相同，但排列不同，双螺旋的稳定性有差别 5’GC5’CG ， 和碱基堆积力有关，碱基堆聚力是嘌呤向嘧啶方向大于嘧啶向嘌呤方向。 Tm值，DNA熔解温度 双螺旋失去一半时的温度， GC含量与Tm成正比。Tm值低的双链容易解开，复制起点的核苷酸多为TA; 反向重复序列 回文序列（palindrome）形成发夹结构，十字形结构，是限制酶的酶切位点。 ;A-DNA 相对湿度75％以下，右手双螺旋，双链反向平行，每周螺旋10.9对碱基，螺距0.26nm ，碱基平面不与螺旋轴垂直，大沟极深;B－DNA 天然状态DNA，相对湿度92％。右手双螺旋，每周螺旋10对碱基(10.4)，螺距3.4nm，碱基平面与螺旋轴垂直，大沟宽而深。 ;Z－DNA 左手双螺旋，每圈螺旋12对碱基，螺距4.6nm，碱基平面与螺旋轴不垂直，无大沟，小沟深而窄 ;其他 形式 四链DNA ;三链DNA 一条DNA链为全嘌呤，另一条链为全嘧啶的区段产生，结果一条嘌呤链和两条嘧啶链构成，H-DNA. 与DNA 的复制可能有关。 ;一条嘌呤和两条嘧啶链构成，(YR*Y) CG*C，TA*T 星号左边的碱基正常配对，右边的碱基异常配对 ;或两条嘌呤和一条嘧啶链构成 (YR*R) CG*G，TA*A，CG*A。;六、DNA的变性和复性 变性：热，试剂，氢键、碱基堆积力破坏，DNA由双链变成单链 温度：80～100℃ 变性剂：尿素，甲酰胺 增色效应（hyperchr